Avainero – immunosytokemia vs immunohistokemia
Immunosytokemia (ICC) ja Immunohistokemia (IHC) ovat kaksi molekyylidiagnostiikan laajasti käytettyä tekniikkaa, jotka tunnistavat ja vahvistavat sekä ei-tarttuvien sairauksien että tarttuvien tautien esiintymisen soluissa olevien molekyylimarkkerien perusteella. Keskeinen ero immunosytokemiassa ja immunohistokemiassa on molekyyli, jota käytetään analyysimenettelynä näissä tekniikoissa. ICC:ssä käytetään primäärisiä ja sekundaarisia vasta-aineita, jotka on konjugoitu markkereihin, kuten fluoresenssiin, kun taas IHC-, monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita käytetään diagnostisiin määrityksiin.
Mikä on immunosytokemia (ICC)?
ICC käyttää primaarisia ja sekundaarisia vasta-aineita, jotka on sidottu markkereihin, kuten fluoresoiviin markkereihin tai entsyymeihin, ja se on tehokas tunnistusmenetelmä kohdesoluissa olevien antigeenien havaitsemiseksi, jotka voivat olla joko tarttuvia soluhiukkasia tai syöpäkasvainsoluja. Immunosytokemiaa varten tarvitaan kolmen tyyppisiä kontrolleja.
- Primary Antibody – kontrolli, joka osoittaa antigeeniin sitoutuvan primaarisen vasta-aineen spesifisyyden
- Toissijainen vasta-aine – kontrolli, joka osoittaa, että leima on spesifinen ensisijaiselle vasta-aineelle
- Label Controls – näytä, että merkintä on seurausta lisätystä etiketistä eikä endogeenisesta merkinnästä.
Kuva 01: Immunosytokemia leimaa yksittäisiä proteiineja soluissa (tässä sympaattisten autonomisten hermosolujen aksoneissa oleva tyrosiinihydroksylaasi on merkitty vihreällä).
Primäärinen vasta-ainekontrolli on spesifinen jokaiselle uudelle vasta-aineelle, eikä sitä voida toistaa jokaisessa kokeessa. Toissijainen vasta-ainekontrolli suunnitellaan kokeessa käytetyn primaarisen vasta-aineen perusteella ja sisällytetään jokaiseen kokeeseen. Merkintähallinta otetaan mukaan, jos toimenpiteen ehtoa muutetaan, näytettä muutetaan tai kun odottamaton merkintä löytyy.
ICC:n kaksi pääsovellusta ovat Radio Immuno – Assay (RIA) ja Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Yleisin käytetty vasta-aine on immunoglobuliini G.
Mikä on immunohistokemia (IHC)?
Immunohistokemiassa lähdenäyte sisältää monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita, jotta voidaan määrittää antigeenien esiintyminen vieraissa soluissa. Tämä tekniikka perustuu antigeenin ja vasta-aineen sitoutumisen spesifiseen reaktioon. Detektiossa käytetyt vasta-aineet voidaan merkitä erilaisilla markkereilla; ne voivat olla fluoresenssimarkkereita, radioleimattuja markkereita tai kemiallisia markkereita. Helpottamalla in vitro -sitoutumista antigeenin ja kohteena olevan vasta-aineen välillä voidaan määrittää solun tietyn proteiinin läsnäolo tai puuttuminen.
Kuva 02: Normaalin munuaisen immunohistokemiallinen värjäys CD10:llä
Tieteilijat ovat tällä hetkellä mukana kehittämässä kohdevasta-aineita tietyille soluissa oleville antigeeneille, jotka voivat kehittyä joko pahanlaatuisina kasvainsoluina tai tartunta-aineissa, kuten HIV:ssä, oleviksi antigeeneiksi.
Mitä yhtäläisyyksiä immunosytokemian ja immunohistokemian välillä on?
- Reaktiot ovat erittäin spesifisiä ja tarkkoja ICC:ssä ja IHC:ssä.
- ICC:n ja IHC:n sovelluksia ovat syövän ja tartuntatautien diagnostiikka.
- Steriilejä olosuhteita tulee säilyttää molemmissa olosuhteissa, ja ne tulee suorittaa in vitro
- Molemmat tekniikat tarjoavat toistettavia tuloksia.
- Molemmat ovat nopeita.
- Radioleimausta, fluoresenssitekniikoita käytetään havaitsemismenetelminä sekä ICC:ssä että IHC:ssä.
- Molemmat perustuvat antigeeni-vasta-aine-parisuhteeseen.
Mitä eroa on immunosytokemialla ja immunohistokemialla?
Immunosytokemia (ICC) vs immunohistokemia (IHC) |
|
| ICC käyttää primaarisia ja sekundaarisia vasta-aineisiin sitoutuneita markkereita, kuten fluoresoivia markkereita tai entsyymejä, ja on tehokas tunnistusmenetelmä kohdesoluissa olevien antigeenien havaitsemiseen. | IHC on menetelmä, joka käyttää monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita määrittämään sellaisten antigeenien läsnäolon, jotka ovat solun pinnalle asetettuja erityisiä proteiinimarkkereita. |
| Näytelähde | |
| ICC:ssä käytetään näytteitä, jotka on saatu kudoksista, jotka on histologisesti käsitelty ohuiksi leikkeiksi. | IHC käyttää näytteitä, jotka koostuvat yksikerroksisessa kerroksessa kasvatetuista soluista tai suspensiossa olevista soluista, jotka asetetaan objektilasille. |
| Näytekäsittely | |
| ICC:ssä solujen tulee olla läpäiseviä helpottaakseen vasta-aineen tunkeutumista solunsisäisiin kohteisiin. | IHC:ssä solut kiinnitetään formaliinilla, upotetaan parafiiniin ennen värjäystä. |
Yhteenveto – Immunosytokemia vs immunohistokemia
Molekyylidiagnostiikkaa käytetään tunnistamaan ja vahvistamaan sekä ei-tarttuvien että tarttuvien tautien esiintyminen soluissa olevien molekyylimarkkerien perusteella. Molekyylimarkkerit voivat olla proteiineja tai DNA:n tai RNA:n sekvenssejä; ICC:n ja IHC:n k altaisten teknologioiden kehitys on tasoittanut tietä, jonka avulla tutkijat voivat tunnistaa taudin ja sen syyn varhaisessa vaiheessa. Sekä ICC että IHC riippuvat vasta-aineen ja antigeenin välisistä spesifisistä reaktioista, vaikka näytelähde. Suurin ero immunosytokemian ja immunohistokemian välillä on näiden kahden menettelyn näytteenkäsittely.
Lataa PDF-versio Immunosytochemistry vs Immunohistochemistry
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä Ero immunosytokemian ja immunohistokemian välillä.
