Avainero RIA:n ja ELISA:n välillä on, että radioimmunomääritys (RIA) on immunomääritystekniikka, joka käyttää radioisotooppeja antigeeni-vasta-ainekompleksien havaitsemiseen, kun taas entsyymikytkentäinen immunosorbenttimääritys (ELISA) on immunomääritystekniikka, joka käyttää entsyymejä antigeenin havaitsemiseen. -vasta-ainekompleksit.
Spesifisten proteiinien, kuten antigeenien, havaitseminen on erittäin tärkeää sairauden diagnosoinnissa. Siksi RIA ja ELISA ovat kaksi immunomääritystekniikkaa, joita käytetään laboratorioissa spesifisten proteiinien, erityisesti antigeenien, nopeaan havaitsemiseen. Yleensä spesifinen vasta-aine sitoutuu kohdeantigeeniin ja muodostaa näkyvän kompleksin, joka tunnetaan saostumana. Nämä vasta-aine- ja antigeenikompleksit voidaan tunnistaa eri tekniikoilla. Antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemistekniikka radioisotooppeja käyttämällä tunnetaan nimellä RIA, ja tekniikka antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemiseksi entsyymejä käyttämällä tunnetaan nimellä ELISA.
Mikä on RIA?
Radioimmunoassay (RIA) on immunomääritystekniikka, joka havaitsee antigeeni- ja vasta-ainekompleksit radioisotooppien avulla. Rosalyn Sussman Yalow kehitti tämän tekniikan vuonna 1960 Solomon Bersonin avulla. Tästä merkittävästä löydöstä Rosalyn Sussman Yalow voitti Nobelin lääketieteen palkinnon vuonna 1977. Tyypillisesti radioimmunomäärityksessä tunnettu määrä antigeeniä tehdään ensin radioaktiiviseksi. Tämä tekniikka käyttää usein jodin gammaradioaktiivisia isotooppeja, nimeltään 125-I, leimaamiseen. antigeenit. Nämä radioisotoopit kiinnittyvät normaalisti antigeenin tyrosiiniaminohappoon. Sitten radioleimattu antigeeni sekoitetaan vasta-aineen kanssa. Tämän seurauksena radioleimattu antigeeni ja vasta-aine sitoutuvat spesifisesti toisiinsa.
Myöhemmin lisätään seeruminäyte, joka sisältää tuntemattoman määrän samaa antigeeniä. Tämä saa seerumin leimaamattoman antigeenin kilpailemaan radioleimatun antigeenin kanssa vasta-aineen sitoutumiskohdista. Kun leimaamattoman antigeenin pitoisuus kasvaa, enemmän siitä sitoutuu vasta-aineeseen ja syrjäyttää radioleimatun variantin. Siten se vähentää vasta-aineeseen sitoutuneen radioleimatun antigeenin ja vapaan radioleimatun antigeenin suhdetta. Toimenpiteen lopussa sitoutuneet antigeenit erotetaan. Lopulta jäljellä olevan supernatantin vapaiden antigeenien radioaktiivisuus mitataan gamma-laskimella.
Mikä on ELISA?
ELISA on immunomääritystekniikka, joka havaitsee antigeeni- ja vasta-ainekompleksit entsyymeillä. Se on biokemiallinen analyyttinen määritys, jonka Engvall ja Perlmann kuvasivat ensimmäisen kerran vuonna 1971. Useimmissa yksinkertaisissa ELISA-tekniikoissa potilasnäytteen antigeenit kiinnitetään kiinteälle pinnalle. Sitten sopiva vasta-aine levitetään pinnalle, jotta se voi sitoutua antigeeniin.
Kuva 01: ELISA
Tämä vasta-aine on liitetty entsyymiin. Myöhemmin kaikki sitoutumattomat vasta-aineet poistetaan pesemällä pesuaineella. Tämän tekniikan viimeisessä vaiheessa entsyymin substraatti lisätään. Jos antigeeni ja vasta-aine sitoutuvat kunnolla, seuraava reaktio tuottaa havaittavan värisignaalin, useimmiten värinmuutoksen.
Mitä yhtäläisyyksiä RIA:n ja ELISA:n välillä on?
- RIA ja ELISA ovat immuunimääritystekniikoita.
- Molemmat tekniikat sisältävät antigeeni- ja vasta-ainekompleksin muodostusta.
- Näitä tekniikoita voidaan käyttää tuntemattomien proteiinien havaitsemiseen näytteistä.
- Molempia käytetään sairauksien diagnosoinnissa laboratorioissa.
- Molemmat ovat erittäin spesifisiä ja herkkiä tekniikoita.
Mitä eroa RIA:lla ja ELISA:lla on?
RIA on immunomääritystekniikka antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemiseksi käyttämällä radioisotooppeja. ELISA on immunomääritystekniikka antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemiseksi käyttämällä entsyymejä. Joten tämä on avainero RIA:n ja ELISA:n välillä. Lisäksi RIA-tekniikassa antigeeni leimataan, mutta ELISA:ssa vasta-aine leimataan. Lisäksi RIA-tekniikassa leimausmolekyylit ovat radioisotooppeja, kun taas ELISA:ssa leimausmolekyylit ovat entsyymejä. Tämä on siis toinen ero RIA:n ja ELISA:n välillä.
Alla oleva infografiikka näyttää enemmän eroja RIA:n ja ELISA:n välillä taulukkomuodossa.
Yhteenveto – RIA vs ELISA
Immunomäärityksillä on erittäin tärkeä rooli erilaisissa bioanalyyttisissä ympäristöissä, kuten kliinisissä diagnostiikassa, biofarmaseuttisessa analyysissä, ympäristön seurannassa, bioturvallisuudessa ja elintarviketestauksessa.1960-luvulta lähtien on kehitetty laaja valikoima immuunimäärityksiä. RIA ja ELISA ovat molemmat immuunimääritystekniikoita. RIA on immunomääritystekniikka antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemiseksi käyttämällä radioisotooppeja. ELISA on immunomääritystekniikka antigeeni-vasta-ainekompleksin havaitsemiseksi entsyymejä käyttämällä. Näin ollen tämä on yhteenveto RIA:n ja ELISA:n välisestä erosta.
