Avainero – Gram Stain vs Culture
Gramvärjäys on värjäystekniikka, joka suoritetaan bakteerien erottamiseksi kahteen ryhmään niiden soluseinän peptidoglykaanikerroksen paksuuden mukaan. Viljelmä on menetelmä mikro-organismien kasvattamiseksi ja ylläpitämiseksi laboratorio-olosuhteissa erilaisia analyysejä varten. Keskeinen ero grammavärjäyksen ja viljelmän välillä on niiden toiminta; gram-kanta bakteerien värjäystekniikka, jossa viljely on menetelmä mikro-organismien kasvattamiseen ja ylläpitämiseen.
Mikä on Gram Stain?
Gramvärjäys on tärkeä differentiaalivärjäystekniikka, jota käytetään bakteerien tunnistamiseen mikrobiologiassa. Tämän tekniikan esitteli tanskalainen bakteriologi Hans Christian Gram vuonna 1884. Gramvärjäys luokittelee bakteerit kahteen pääryhmään: grampositiivisiin ja gramnegatiivisiin; nämä ovat erittäin tärkeitä bakteerien luokittelussa ja tunnistamisessa. Gram-värjäys suoritetaan bakteerien karakterisoinnin alkuvaiheena.
Bakteerit ryhmitellään niiden soluseinän erojen perusteella. Grampositiiviset bakteerit sisältävät paksun peptidoglykaanikerroksen soluseinämässään, kun taas gramnegatiiviset bakteerit sisältävät ohuen peptidoglykaanikerroksen soluseinässään kuvan 01 mukaisesti. Gram-värjäyksen tulos perustuu paksuuseroon solun peptidoglykaanikerroksessa. soluseinä.
Kuva 1: Grampositiiviset bakteerit ja gramnegatiiviset bakteerit
Gramvärjäys suoritetaan käyttämällä neljää eri reagenssia, nimittäin; ensisijainen petsi, peittausaine, värinpoistoaine ja vastapetsi. Kristallivioletti ja safraniini toimivat ensisijaisina tahroina ja vastaavasti vastavärinä, kun taas gramman määrä jodia ja 95-prosenttista alkoholia toimivat peittausaineena ja vastaavasti värinpoistoaineena.
Gramsin tahran perusvaiheet
- Bakteerinäyte valmistetaan puhtaalle lasilevylle, lämpökiinnitetään ja jäähdytetään.
- Smearia tulvii kristalliviolettia 1–2 minuutin ajan.
- Smear huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä ylimääräisten tahrojen poistamiseksi.
- Grammaa jodia levitetään kokeeseen 1 minuutin ajan.
- Swear huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä
- Smear pestään 95 % alkoholilla 2–5 sekunnin ajan ja huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä.
- Smear vastavärjätään safraniinilla 1 minuutin ajan
- Swear huuhdellaan hitaasti juoksevalla vesijohtovedellä, kuivataan ja tarkkaillaan mikroskoopin alla.
Gram-värjäyksen lopussa gram-negatiiviset bakteerit havaitaan vaaleanpunaisena, kun taas gram-positiiviset bakteerit havaitaan purppuranvärisenä kuvan 02 mukaisesti. Gram-värjäyksen tulos määräytyy paksuuden perusteella. peptidoglykaanikerroksen soluseinässä. Värinpoistovaiheen aikana primäärinen tahra ja peittausaine poistetaan helposti gramnegatiivisista bakteereista ja ne muuttuvat värittömiksi, koska niissä on ohut peptidoglykaanikerros. Ensisijainen tahra säilyy grampositiivisissa bakteereissa, koska niissä on paksu peptidoglykaanikerros. Vastavärjäys ei ole tehokas grampositiivisille bakteereille, koska ensisijainen tahra jää kiinni. Joten grampositiiviset bakteerit näkyvät ensisijaisessa tahravärissä, eli violetissa värissä. Vastavärjäys värjää gramnegatiiviset bakteerit ja on näkyvissä safraniinin värisenä. Siksi bakteerit on helppo luokitella kahteen ryhmään gramvärjäyksen perusteella ja se on arvokasta bakteerien erilaistumisen ja tunnistamisen kann alta.
Kuva 2: Gram-kanta
Mitä kulttuuri on?
Mikrobiviljelmä on menetelmä mikro-organismien viljelyyn ja ylläpitoon laboratorio-olosuhteissa eri tarkoituksiin. Viljelmiä kasvatetaan kiinteissä, puolikiinteissä ja nestemäisissä väliaineissa mikro-organismien viljelyn tyypin ja tarkoituksen mukaan. Viljelmät saavat tarvittavat ravinteet ja kasvuolosuhteet, joita mikro-organismit tarvitsevat. Viljelyalustassa on erilaisia komponentteja, kuten energialähde, hiilenlähde, typen lähde, mineraalit, hivenravinteet, vesi, kiinteytysaine jne. Optimaalinen lämpötila, happi ja pH tulee säätää kasvatetun mikro-organismin tyypin mukaan.
Mikrobiviljelmiä on erilaisia; esimerkiksi panosviljelmä, jatkuva viljely, pistoviljelmä, agarmaljaviljelmä, liemiviljelmä jne. Kasvualustan koostumuksen mukaan on olemassa erilaisia viljelyalustoja, jotka tunnetaan synteettisinä, puolisynteettisinä ja luonnollisina alustana. Mikrobiviljelmät valmistetaan steriileissä olosuhteissa erityisessä kammiossa, jota kutsutaan laminaariseksi ilmavirtaukseksi. Kasvualusta ja lasitavarat steriloidaan ennen halutun mikro-organismin ymppäämistä. Asianmukaisissa steriileissä olosuhteissa kohdemikro-organismi siirretään steriloituun ravintoalustaan ja inkuboidaan optimilämpötilassa. Elatusaineessa mikro-organismit kasvavat ja lisääntyvät käyttämällä toimitettuja ravintoaineita.
Kuva 3: Bakteeriviljelmä levyllä
Mitä eroa on Gram Stainin ja Culturen välillä?
Gram Stain vs Culture |
|
| Grams-kanta on differentiaalinen värjäystekniikka, jota käytetään bakteerien erilaistumiseen ja tunnistamiseen. | Mikrobiviljelmä on menetelmä mikro-organismien kasvattamiseksi laboratoriossa. |
| Komponentit | |
| Tässä käytetään erilaisia reagensseja, mukaan lukien kaksi tahraa. | Tämä käyttää erilaisia viljelyalustoja, kuten kiinteitä, puolikiinteitä ja nestemäisiä ravintoaineita ja muita tarvittavia olosuhteita. |
| Perustoiminnot | |
| Tämä mahdollistaa bakteerien ryhmittelyn kahteen ryhmään: gramnegatiivisiin ja grampositiivisiin. | Tämä mahdollistaa mikro-organismien lisääntymisen eri tarkoituksiin. |
| Base | |
| Gram-värjäystulos perustuu eroihin soluseinän peptidoglykaanikerroksessa. | Mikro-organismit kasvavat ja lisääntyvät elatusaineessa. |
| Tulos | |
| Gramnegatiiviset bakteerit näkyvät vaaleanpunaisena ja grampositiiviset bakteerit näkyvät purppuranvärisenä. | Maljoilla voidaan nähdä mikro-organismien pesäkkeitä. Nestemäisellä alustalla mikro-organismit ovat suspendoituneessa muodossa. |
Yhteenveto – Gram Stain vs Culture
Mikrobiviljelmiä valmistetaan ja ylläpidetään laboratorio-olosuhteissa eri tarkoituksiin, kuten varastointiin, testaukseen, kemialliseen puhdistukseen jne. Gramsin värjäys on värjäysmenetelmä, joka erottaa bakteerit kahteen pääryhmään, joita kutsutaan gramnegatiivisiksi bakteereiksi ja grampositiivisiksi bakteereiksi. Siksi gramvärjäyksen ja viljelmän välinen ero on se, että gramvärjäys on bakteerien värjäystekniikka, kun taas viljelmä on menetelmä mikro-organismien kasvattamiseksi ja ylläpitämiseksi laboratorioissa.
