Transformaatio vs Transfektio
Transformaatio ja transfektio ovat kaksi yksinkertaista tekniikkaa, joita käytetään viemään vieras geeni isäntäsoluun. Nämä tekniikat riippuvat kuitenkin isäntä- tai vektorijärjestelmän tyypistä.
Mitä on solujen transformaatio?
Transformaatio on tekniikka, jota käytetään geenien viemiseen hiiva- ja bakteerisoluihin. Tämä tekniikka aiheuttaa yleensä perinnöllisiä muutoksia geeneissä ja siten geenin ilmentyminen on pysyvää. Frederick Griffith esitteli bakteeritransformaation ensimmäisen kerran vuonna 1928. Sitten 1970-luvun alussa tätä tekniikkaa käytettiin E.coli. E. colin transformaatioprosessin aikana solut liotetaan jääkylmässä CaCl2 Tämä vaihe tekee E. coli -soluista toimiv altaisia. Tämän jälkeen kompetentit solut sekoitetaan plasmidi-DNA:n kanssa ja niitä inkuboidaan jäissä 20-30 minuuttia. Sitten annetaan lyhyt lämpöshokki DNA:n siirtämiseksi soluun. Lopuksi solut asetetaan ravintoliemeen ja niitä inkuboidaan 37 °C:ssa 60-90 minuuttia plasmidien muodostamiseksi. Kun nämä vaiheet on suoritettu onnistuneesti, transformoidut solut voidaan sijoittaa sopivalle alustalle solujen lisäämistä varten. Koska transformaatiota pidetään tehottomana tekniikkana, sitä ei saa käyttää kloonipankkien valmistukseen.
Mikä on solutransfektio?
Transfektio on tapa viedä vieras geeni yleensä nisäkässoluihin. On olemassa kaksi transfektiomenetelmää; nimittäin ohimenevä transfektio ja stabiili transfektio. Ohimenevässä transfektiossa geenin ilmentyminen on saatavilla rajoitetun ajan; siten geenin muutos aiheuttaa tilapäistä ilmentymistä. Tämä transfektiomenetelmä on yksinkertainen ja nopea; joten sitä voidaan käyttää rutiininomaisesti. Yksi ohimenevän transfektion haittapuoli on vaikeus soveltaa laajamittaisia proteiinisynteesijärjestelmiä.
Stabiidin transfektion aikana kohdegeeni integroituu isäntäsolun genomiin ja siten geenin ilmentyminen on pysyvää, toisin kuin ohimenevä transfektio.
Mitä eroa on transformaatiolla ja transfektiolla?
• Transformaatio on geenin viemistä prokaryoottisoluun (bakteeri- ja hiivasoluun), kun taas transfektiota kutsutaan yleensä geenin viemiseksi nisäkässoluun.
• Transformaatio johtaa periytyviin muutoksiin geeneissä, kun taas transfektio voi johtaa joko tilapäiseen ilmentymiseen tai pysyviin muutoksiin geeneissä.
