Avainero elektroporaation ja mikroinjektion välillä on se, että elektroporaatio on tekniikka, joka käyttää korkeajännitteistä sähköpulssia DNA:n kuljettamiseen isäntäsoluihin, kun taas mikroinjektio on tekniikka, joka käyttää hienokärkistä lasineulaa tai mikropipettiä DNA:n kuljettamiseen isäntäsolut.
Transformaatio on prosessi, jolla vieras DNA siirtyy isäntäsoluihin. Transformaatiolla organismin geneettistä rakennetta voidaan muuttaa. On olemassa erilaisia kemiallisia, biologisia ja fysikaalisia muunnosmenetelmiä. Jotkut ovat suoria menetelmiä, kun taas toiset ovat epäsuoria menetelmiä. Elektroporaatio ja mikroinjektio ovat kaksi fysikaalista menetelmää, jotka ovat suoria muunnosmenetelmiä. Elektroporaatio käyttää sähkökenttää mikroskooppisten huokosten indusoimiseksi biologisiin solukalvoihin DNA:n sisällyttämiseksi isäntäsoluihin. Mikroinjektio puolestaan antaa DNA:n suoraan mikropipetillä tai hienokärkisellä lasineulalla.
Mitä on elektroporaatio?
Elektroporaatio on transformaatiotekniikka, joka kuljettaa DNA:ta kasvisoluihin ja protoplasteihin. Tämä tekniikka käyttää korkeajännitteistä sähköpulssia. Kasvimateriaaleja inkuboidaan puskuriliuoksessa, jossa on DNA. Sitten liuokseen kohdistetaan korkeajännitesähköpulssi. Kasvien solukalvoihin muodostuu korkeajännitteisiä huokosia, joiden kautta DNA kulkeutuu solujen sisään ja integroituu kasvin genomisen DNA:han. Tämän menetelmän tehokkuus riippuu kasvimateriaaleista ja käsittelyolosuhteista.
Kuva 01: Elektroporaatio
Kun transformaatio tehdään elektroporaatiolla, vain 40-50 % soluista saa DNA:ta. Lisäksi vain 50 % transformoiduista soluista voi selviytyä tällä menetelmällä. Tämä menetelmä on kuitenkin helppo suorittaa, eikä se muuta solujen biologista rakennetta tai toimintaa. Lisäksi sitä voidaan käyttää monenlaisiin soluihin.
Mikä on mikroinjektio?
Mikroinjektio on transformaatiotekniikka, joka on erityisen hyödyllinen siirrettäessä DNA:ta suuriin soluihin. Tässä menetelmässä käytetään hienokärkistä lasineulaa tai mikropipettiä DNA:n kuljettamiseen kasvien protoplasteihin tai eläinsoluihin (oosyytit, munat ja alkiot). Itse asiassa tämä menetelmä soveltuu paremmin siirtogeenisten eläinten, kuten hiirten, valmistamiseen. Tässä menetelmässä DNA liitetään suoraan tumaan tai sytoplasmaan.
Samalainen kuin elektroporaatio, mikroinjektio on suora muunnostekniikka. Mikroinjektio suoritetaan erityisellä mikroskoopilla. Pipetin, neulan, mikroskooppilavan ja videotekniikan tietokoneistettu ohjaus on lisännyt tämän tekniikan tehokkuutta. DNA:ta ruiskettaessa voidaan käyttää väriainetta transformoituneiden solujen tunnistamiseen. Siksi ei ole tarvetta käyttää erillistä menetelmää transformoituneiden solujen tunnistamiseen. Mikä tärkeintä, mikroinjektiomenettely ei vaadi merkkigeeniä.
Kuva 02: Mikroinjektio
Lisäksi tämä menetelmä on erittäin tehokas ja toistettava. Tämä menetelmä on kuitenkin kallis, aikaa vievä ja vaatii ammattitaitoista henkilöä. Myös vain pieni määrä soluja voidaan käsitellä tällä menetelmällä.
Mitä yhtäläisyyksiä sähköporaation ja mikroinjektion välillä on?
- Sekä elektroporaatio että mikroinjektio ovat kahdenlaisia muunnostekniikoita.
- Nämä menetelmät kuljettavat DNA:ta kasvisoluihin ja protoplasteihin.
- Ne ovat suoria menetelmiä.
- Lisäksi ne ovat fyysisiä tai mekaanisia menetelmiä.
- Molemmat menetelmät ovat hyödyllisiä siirtogeenisten kasvien ja eläinten tuotannossa.
Mitä eroa on elektroporaatiolla ja mikroinjektiolla?
Elektroporaatiotekniikka käyttää sähkökenttää DNA:n lisäämiseen, kun taas mikroinjektiotekniikka on mikropipetti tai hienokärkinen lasineula DNA:n lisäämiseen. Siksi tämä on avainero elektroporaation ja mikroinjektion välillä. Lisäksi elektroporaatiota käytetään enimmäkseen kasvisoluihin ja protoplasteihin, kun taas mikroinjektiota käytetään enimmäkseen eläinsoluihin. Lisäksi elektroporaatio ei ole yhtä aikaa vievää kuin mikroinjektio.
Alla olevassa infografiikassa on yhteenveto elektroporaation ja mikroinjektion välisistä eroista taulukkomuodossa.
Yhteenveto – sähköporaatio vs mikroinjektio
Elektroporaatio ja mikroinjektio ovat kaksi fyysistä geeninsiirtomenetelmää. Elektroporaatiossa käytetään korkeajännitteistä sähkökenttää, kun taas mikroinjektiossa käytetään lasineulaa tai mikropipettiä. Siksi tämä on avainero elektroporaation ja mikroinjektion välillä. Molemmat menetelmät vievät kuitenkin suoraan eksogeenistä DNA:ta isäntäsoluihin.
