Avainero C18- ja fenyylikolonnien välillä on, että C18-HPLC-kolonnien erotus on pienempi kuin fenyyli-HPLC-kolonneilla.
C18-kolonni HPLC:ssä on kolonni, joka käyttää C18-ainetta stationaarifaasina, kun taas fenyylikolonni on eräänlainen kolonni, joka löytyy joistakin HPLC-laitteista. Siinä on lyhyitä alkyylifenyyliligandeja, jotka ovat kovalenttisesti sitoutuneita piidioksidin pintaan.
Mikä on C18-sarake?
HPLC:n C18-kolonni on kolonni, joka käyttää C18-ainetta stationaarifaasina. Siksi nämä tunnetaan C18 HPLC -kolonneina. Nämä ovat hyödyllisiä ympäristötieteissä ja kemiallisessa analyysissä. Lisäksi C18 HPLC -kolonnit ovat tärkeitä lääketeollisuudessa ja ympäristötieteissä kemiallisten seosten yksittäisten osien analysoinnissa.
Kuva 01: Tyypillinen HPLC-kolonni
Näissä C18-kolonnissa käytetään tyypillisesti oktaldekyylisilaania, ja tämä aine sisältää 18 hiiliatomia, jotka ovat sitoutuneet piidioksidiin. Tämä tarkoittaa, että tässä yhdisteessä on enemmän hiiliatomeja ja pidempi hiiliketju kuin C-8:ssa. Ylimääräiset hiiliatomit näissä hiiliketjuissa muodostavat suuren pinta-alan liikkuvalle faasille kulkea poikki.
Yleensä voimme käyttää C18-kolonnia HPLC:ssä käänteisfaasikolonnina. Tämä johtuu siitä, että tämän tyyppisessä kolonnissa käytetään polaarisempia liuottimia (esim. vettä, metanolia ja asetonitriiliä). Lisäksi paikallaan oleva faasi on polaariton hiilivety (C18).
Mikä on fenyylipylväs?
Fenyylikolonni on eräänlainen pylväs, joka löytyy joistakin HPLC-laitteista, joissa on lyhyitä alkyylifenyyliligandeja kovalenttisesti sitoutuneena piidioksidin pintaan. Nykyaikaisissa HPLC-kolonneissa voimme kuitenkin löytää difenyylifaaseja, jotka on kehitetty tehostamaan pi-pi-vuorovaikutusta. Siinä on lyhyt alkyylisidos, joten fenyylipylväistä puuttuu tyypillisesti hydrofobinen retentio ja sillä on alhainen hydrolyyttinen stabiilisuus.
Kuva 02: Näyte HPLC-pumppu
Fenyylikolonnit ovat erittäin onnistuneita erottamaan sijaintiisomeerejä, tokoferoleja, flavonoideja, polynukleaarisia aromaattisia yhdisteitä, nitroaromaattisia yhdisteitä, vaikuttavia farmaseuttisia aineosia ja muita vastaavia yhdisteitä.
Mitä eroa on C18:n ja fenyylikolonnin välillä?
HPLC-instrumentissa on kolonni, joka on hyödyllinen seoksen komponenttien erottamisessa. HPLC-laitteissa on erilaisia pylväitä. C18-kolonni ja fenyylikolonni ovat kaksi tällaista kolonnia. Keskeinen ero C18- ja fenyylikolonnin välillä on, että C18-HPLC-kolonnien antama erotus on pienempi verrattuna fenyyli-HPLC-kolonniin. Lisäksi fenyylikolonnin antama resoluutio on korkeampi verrattuna C18-kolonniin. Lisäksi C18-kolonnin stationäärinen faasi on C18-yhdiste, kuten oktaldekyylisilaani, kun taas fenyylipylvään stationäärinen faasi on valmistettu lyhyistä alkyylifenyyliligandeista, jotka ovat kovalenttisesti sitoutuneita piidioksidin pintaan.
Alla oleva infografiikka esittää C18:n ja fenyylikolonnin väliset erot taulukkomuodossa vierekkäin vertailua varten.
Yhteenveto – C18 vs fenyylikolonni
HPLC:n C18-kolonni on kolonni, joka käyttää C18-ainetta stationaarifaasina. Samaan aikaan fenyylipylväs on eräänlainen pylväs, joka löytyy joistakin HPLC-laitteista, joissa on lyhyitä alkyylifenyyliligandeja, jotka on sitoutunut kovalenttisesti piidioksidin pintaan. Keskeinen ero C18- ja fenyylikolonnien välillä on, että C18-HPLC-kolonnien erotus on pienempi kuin fenyyli-HPLC-kolonneilla.
