Avainero fiksaation ja stabiloinnin välillä on, että fiksaatioon liittyy kiinnitysreagenssin nopea tunkeutuminen kudoksiin ja kudosten kiinnittäminen olemassa olevaan biomolekyylirakenteeseen, kun taas stabilointiprosessi sisältää kiinnitysprosessin lopettamisen ja biomolekyylien optimaalisen suojan pitkäksi aikaa ajanjakso.
Kiinnitys ja stabilointi ovat erittäin tärkeitä biokemian prosesseja kudosten säilyttämisen ja viljelyn kann alta.
Mitä on kiinnitys?
Kiinnitys on analyyttinen prosessi, jolla solujen ja kudosten aineosat kiinnitetään fysikaaliseen ja osittain kemialliseen tilaan, jotta ne kestävät myöhempiä käsittelyjä, mukaan lukien erilaisia reagensseja. Tässä prosessissa reagenssien hävikki on minimaalinen, ja siinä tapahtuu merkittävää vääristymistä tai hajoamista.
Kun kudos poistetaan kehosta, sillä on taipumus käydä läpi itsetuhoprosessin, joka tunnetaan autolyysinä. Siksi, jos jätämme tämän kudoksen ilman säilytystä, voi tapahtua bakteerihyökkäys (tätä kutsutaan mädäntymiseksi). Näiden prosessien välttämiseksi vaaditaan kudosnäytteiden säilöntä ja kovettaminen, jotta elävien kudosten rakenne säilyy mahdollisimman lähellä.
Tämä tekniikka on tärkeä autolyysin ja mädäntymisen estämiseksi, tärkeä nopean ja tasaisen tunkeutumisen kann alta, solujen ja kudosten mahdollisimman elävänä säilymisen kann alta, labiilien elementtien stabiloimiseksi jne.
Kuva 01: Kudosten säilöntä
Voimme käyttää useita erilaisia kiinnitysmenetelmiä. Tämä sisältää lämpökäsittelyn, kemikaalien, kuten koagulanttien jne. käytön. Voimme luokitella yleisimmät kemialliset kiinnitysaineet useisiin ryhmiin, kuten aldehydit, hapettavat aineet, proteiinien denaturointiaineet, silloitusaineet ja muut.
Lisäksi kiinnittymiseen vaikuttavat erilaiset tekijät, kuten vetyionipitoisuus, lämpötila, tunkeutuminen, osmolaliteetti ja pitoisuuden kesto.
Mitä on stabilointi?
Stabilointi on analyyttinen prosessi, joka on hyödyllinen pysäyttämään kiinnitysprosessin ja suojaamaan optimaalisesti biomolekyylejä pitkäaikaista varastointia varten. Siksi tämä prosessi tulee kiinnitysvaiheen jälkeen. Stabilisaattoreilla, kuten PAXgene Tissue Stabilizer, voimme suojata kudosnäytteitämme noin 7 päivän ajan huoneenlämmössä ja voimme säilyttää niitä jopa 4 viikkoa erittäin alhaisissa lämpötiloissa. Jos lämpötila laskee miinukseen, voimme säilyttää kudokset jopa useita vuosia.
Kudosten välitön stabilointi on tärkeää myös DNA<:n RNA:n ja proteiinien in vivo -profiilin säilyttämiseksi. Suurin osa nykyisin käyttämistämme stabilointiaineista on formaliinittomia säilöntäaineita, jotka antavat parempia molekyylituloksia kiinteistä kudoksista.
Mitä eroa on kiinnityksellä ja stabiloimalla?
Kiinnitys ja stabilointi ovat tärkeitä analyyttisiä tekniikoita. Keskeinen ero fiksaation ja stabiloinnin välillä on se, että fiksaatioon liittyy kiinnitysreagenssin nopea tunkeutuminen kudoksiin ja kudosten kiinnittäminen olemassa olevaan biomolekyylirakenteeseen, kun taas stabilointiprosessi sisältää kiinnitysprosessin lopettamisen ja biomolekyylien optimaalisen suojaamisen pitkäksi aikaa. Lisäksi kiinnitykseen liittyy lämpökäsittelymenetelmiä ja kemiallisia menetelmiä (esim. koagulanttikemikaaleja ja ei-koagulanttikemikaaleja), kun taas stabilointiin liittyy jäädyttäminen alhaisiin lämpötiloihin.
Seuraava on yhteenveto kiinnityksen ja stabiloinnin eroista taulukkomuodossa.
Yhteenveto – Kiinnitys vs stabilointi
Kiinnitys ja stabilointi ovat erittäin tärkeitä biokemian prosesseja kudosten säilytys- ja viljelyvaatimusten kann alta. Keskeinen ero fiksaation ja stabiloinnin välillä on se, että fiksaatioon liittyy kiinnitysreagenssin nopea tunkeutuminen kudoksiin ja kudosten kiinnittäminen olemassa olevaan biomolekyylirakenteeseen, kun taas stabilointiprosessi sisältää kiinnitysprosessin lopettamisen ja biomolekyylien optimaalisen suojaamisen pitkäksi aikaa.
