Avainero – TLC vs HPTLC
TLC ja HPTLC ovat kaksi kemiallista tekniikkaa, joita käytetään haihtumattomien komponenttien erottamiseen seoksesta. Keskeinen ero TLC:n ja HPTLC:n välillä on, että TLC-levyn imukykyisessä materiaalissa on suuria hiukkasia, kun taas HPTLC-levyissä on hyvin pieniä adsorptiomateriaalin hiukkasia.
TLC on ohutkerroskromatografia. HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia, joka on edistynyt tekniikka verrattuna TLC-menetelmään.
Mikä on TLC?
TLC tai ohutkerroskromatografia on kemiallinen perustekniikka, jota käytetään erottelemaan haihtumattomia komponentteja seoksesta. Tämä koe suoritetaan käyttämällä lasia, muovia tai paperia. Tämä levy on päällystetty ohuella kerroksella selluloosaa tai silikageeliä (adsorbenttimateriaali). Tämä ohut kerros tunnetaan TLC:n stationaarifaasina. Levy tunnetaan nimellä TLC-levy.
Ennen koetta pohjaviiva ja ylälinja on merkitty kynällä TLC-levylle. Sitten näyte havaitaan tätä linjaa pitkin kapillaariputkella. Tämän jälkeen TLC-levy asetetaan pystysuoraan liikkuvaan faasiin. Liikkuva faasi on liuotin (tai liuottimien seos), joka on sijoitettu säiliöön. Kun TLC-levy asetetaan tähän liikkuvaan faasiin, perusviiva tulee pitää liuottimen rajan yläpuolella. Muussa tapauksessa näyte liukenee liuottimeen.
TLC-levyn annetaan olla liikkuvassa faasissa jonkin aikaa. Sitten ajan myötä liikkuva faasi nousee levyä ylöspäin kapillaaritoiminnan vuoksi. Jos näyte liukenee liikkuvaan faasiin, se nousee ylöspäin liikkuvan faasin mukana.
Tämän TLC-menetelmän taustalla on "kuten liuottaa samanlainen" -periaate. Tämä tarkoittaa, että polaariset yhdisteet liukenevat polaarisiin liuottimiin, kun taas ei-polaariset yhdisteet liukenevat ei-polaarisiin liuottimiin. Pysyvä faasi on yleensä silikageeliä tai selluloosaa, joka on polaarinen yhdiste. Käytetty liikkuva faasi on ei-polaarinen liuotin, kuten heksaani. Siksi, jos näyte sisältää ei-polaarisia komponentteja, nämä komponentit kulkeutuvat ylöspäin liikkuvan faasin mukana. Polaariset komponentit tarttuvat levyyn. Liikkuvien komponenttien joukossa kohtalaisen polaariset yhdisteet kulkeutuvat hitaasti, kun taas erittäin polaariset yhdisteet kulkeutuvat nopeasti. Kun liuotinrintama on saavuttanut TLC-levyn ylälinjan, levy otetaan ulos ja annetaan kuivua.
Kuva 01: TLC-tekniikka
Jos näytteen komponentit olivat värillisiä yhdisteitä, levyllä tulisi olla värikkäitä pisteitä eri kohdissa. Mutta jos komponentit olivat värittömiä, tulisi käyttää muita tekniikoita; esimerkiksi ruiskuttamalla ninhydriiniä ammoniakin tai amiinien havaitsemiseksi (primääriset amiinit ja sekundaariset amiinit).
Mikä on HPTLC?
HPTLC tai korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia on ohutkerroskromatografian (TLC) edistynyt muoto. HPTLC:n resoluutio ja tarkkuus ovat erittäin korkeat. Useimmat tämän tekniikan vaiheet voidaan automatisoida.
HPTLC:ssä käytetyt levyt sisältävät erittäin pienikokoisia silikageelihiukkasia ja geelin pakkaustiheys levyllä on korkea. Levyn pinta on sileä ja antaa tehokkaan erottelun. Analyysi on nopeampi kuin TLC-tekniikka. Tämän menetelmän herkkyys on myös korkea. HPTLC:ssä useita eri näytteitä voidaan erottaa samalla levyllä ilman näytteen valmisteluvaihetta.
Mitä eroa on TLC:n ja HPTLC:n välillä?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC on ohutkerroskromatografia. | HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia. |
| Tekniikka | |
| Se on kemiallinen perustekniikka, jota käytetään seoksen haihtumattomien komponenttien erottamiseen. | Se on ohutkerroskromatografian (TLC) edistynyt muoto. |
| Latti | |
| TLC-levy voidaan valmistaa paperista, muovista tai lasista, joka on levitetty adsorboivalla materiaalilla, jossa on suuria hiukkasia. | HPTLC-levyillä on hyvin pieniä adsorptiomateriaalin hiukkasia. |
| Resoluutio | |
| TLC-menetelmä antaa huonon resoluution, kun näytteessä on komponentteja, joilla on samanlaiset ominaisuudet. | HPTLC-menetelmä antaa korkean resoluution. |
| Aika | |
| TLC-tekniikka on aikaa vievä tekniikka. | HPTLC antaa tuloksia suuremmalla nopeudella kuin TLC-menetelmä. |
Yhteenveto – TLC vs HPTLC
HPTLC on TLC:n edistynyt muoto. Keskeinen ero TLC:n ja HPTLC:n välillä on, että TLC-levy voidaan valmistaa paperista, muovista tai lasista, johon on levitetty adsorbenttimateriaalia, jossa on suuria hiukkasia, kun taas HPTLC-levyissä on hyvin pieniä adsorptiomateriaalin hiukkasia.
