Avainero geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä on, että geenin monistaminen on prosessi, jossa tehdään monia kopioita kiinnostavasta geenistä in vitro polymeraasiketjureaktion avulla. Geenikloonaus on kuitenkin prosessi, jossa tehdään monia kopioita kiinnostavasta geenistä in vivo tekemällä rekombinanttiplasmidi ja muuntamalla se isäntäbakteeriksi.
Geeni on spesifinen DNA-fragmentti, joka koodaa proteiinia. Eliöllä on tuhansia geenejä. Lisäksi on mahdollista monistaa tärkeiden geenien DNA-sekvenssejä molekyylibiologisilla tekniikoilla. Geenien monistaminen ja geenin kloonaus ovat kaksi tällaista menettelyä. Molemmat menetelmät tuottavat monia kopioita kiinnostavasta geenistä. Geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä on kuitenkin ero niiden metodologian suhteen.
Mikä on geenin monistus?
Geenien monistaminen on prosessi, jossa tehdään kopioita tietystä geenistä käyttämällä polymeraasiketjureaktiota. Geenin monistamiseksi kyseisen organismin DNA tulee uuttaa käyttämällä asianmukaista DNA-uuttoprotokollaa. Sitten uutettu kaksijuosteinen DNA tulisi denaturoida, jotta saadaan erotettuja yksijuosteita. Seuraava vaihe sisältää PCR-reaktion käyttämisen kopioiden tekemiseen kiinnostuksen kohteena olevasta geenistä. Lisäksi PCR-seos sisältää tarvittavia alukkeita, nukleotideja, DNA-polymeraasientsyymiä, templaatti-DNA:ta ja muita aineosia. PRC-ohjelman lopussa tapahtuu kiinnostavan geenin monistuminen.
Kuva 01: Geenien monistus
Lisäksi geenin monistus on ensimmäinen vaihe tietyn sekvenssin havaitsemisessa, organismin tunnistamisessa, sairauksien diagnosoinnissa ja geenikirjastojen tekemisessä jne.
Mitä on geenikloonaus?
Geenikloonaus on geenitekniikan menetelmä geenikirjastojen tai monien kopioiden tekemiseksi kiinnostavasta geenistä. Tämä prosessi sisältää rekombinanttiplasmidin valmistamisen ja yhdistelmäplasmidin transformoinnin isäntäsoluksi, erityisesti bakteerisoluksi. Klooni on identtinen kopio alkuperäisestä organismista tai molekyylistä. Geenikloonaus voi tehdä tuhansia geeniklooneja.
Kuva 02: Geenikloonaus
Kun kiinnostava geeni on tunnistettu, se voidaan erottaa tietyn organismin genomista rajoittamalla se tietyillä restriktioentsyymeillä. Sitten samaa restriktioentsyymiä käyttämällä plasmidit (vektorit) tulisi avata geenifragmentin lisäämiseksi. Sitten rekombinanttiplasmidi transformoidaan isäntäbakteeriksi käyttämällä erilaisia menetelmiä, kuten elektroporaatiota. Jotkut rekombinanttiplasmideista pääsevät isäntäbakteerisoluihin. Transformoituneet bakteerit voidaan valita, eristää ja viljellä tuoreessa alustassa käyttämällä antibioottia. Siten tämä tekniikka auttaa saamaan miljoonia geeniklooneja.
Mitä yhtäläisyyksiä geenien monistamisen ja geenikloonauksen välillä on?
- Geenien monistaminen ja geenin kloonaus ovat kaksi molekyylibiologista tekniikkaa.
- Molemmissa näissä tekniikoissa tietty DNA-sekvenssi tai geeni moninkertaistuu miljoonilla tai tuhansilla kertoja.
- Lisäksi molemmat tekniikat ovat äärimmäisen tärkeitä monille tieteenaloille.
Mitä eroa on geenien monistamisen ja geenikloonauksen välillä?
Geenien monistaminen on prosessi, joka tekee kopioita tietystä geenistä käyttämällä in vitro -menetelmää nimeltä PCR. Toisa alta geenikloonaus on prosessi, joka tekee kopioita tietystä geenistä in vivo -menetelmällä rakentamalla rekombinanttivektoreita ja monistamalla niitä elävässä organismissa. Joten tämä on avainero geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä. Lisäksi geenin monistaminen kestää vain muutaman tunnin, kun taas geenin kloonaus kestää useita päiviä. Siksi voimme pitää tätä myös erona geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä. Lisäksi geenin monistusprosessi näyttää vähemmän virheitä, kun taas geenin kloonausprosessi näyttää enemmän virheitä.
Seuraava infografiikka tekee yhteenvedon eroista geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä.
Yhteenveto – Geenien monistaminen vs geenikloonaus
Geenin monistaminen on prosessi, jossa kopioidaan halutusta geenistä käyttämällä polymeraasiketjureaktiota in vitro -olosuhteissa, kun taas geenikloonaus on prosessi, jossa kopioidaan kiinnostavasta geenistä käyttämällä yhdistelmä-DNA-molekyyliä ja elävää organismia/isäntä. bakteeri. Siten tämä on perusero geenin monistamisen ja geenikloonauksen välillä.
