Avainero Elisan ja Western blotin välillä on se, että Elisa tai entsyymi-immunomääritys on diagnostinen työkalu, joka havaitsee, onko potilas altistunut tietyntyyppiselle virukselle tai muulle tartunnanaiheuttajalle, kun taas Western blot on tekniikka, joka havaitsee tietyn proteiinin proteiininäytteestä.
AIDSista on tullut maailmanlaajuinen ongelma, ja tämän tappavan taudin ilmaantuvuus on lisääntynyt hälyttävästi viime vuosikymmeninä. HIV-testit havaitsevat tämän oireyhtymän aiheuttavan ihmisen immuunikatoviruksen (HIV). Eri HIV-testeistä ELISA ja Western Blot ovat erittäin suosittuja nykyään. ELISA tarkoittaa entsyymikytkentäistä immunosorbenttimääritystä, joka on levypohjainen määritystekniikka. Se on entsyymi-immunomääritys, jota käytetään HIV-vasta-aineiden havaitsemiseen. Western blot havaitsee tietyn proteiinin proteiiniseoksesta käyttämällä leimattua vasta-ainetta.
Avainero
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on Elisa
3. Mikä on Western Blot
4. Elisan ja Western Blotin yhtäläisyydet
5. Vierekkäinen vertailu – Elisa vs Western Blot taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Mikä Elisa on?
ELISA, joka on lyhenne sanoista entsyymi-immunosorbenttimääritys, oli ensimmäinen testi, joka oli suunniteltu ensisijaisesti HIV:n havaitsemiseen. Se on levypohjainen määritys. Sitä käytetään HIV-vasta-aineiden havaitsemiseen, ja tämä testi osoittaa korkean herkkyyden. Tässä tekniikassa näytteen antigeenit sitoutuvat kiinteällä pinnalla olevien immobilisoitujen vasta-aineiden kanssa. Kun antigeenit on kiinnitetty, ne muodostavat komplekseja entsyymeihin liittyvien vasta-aineiden kanssa. Sitten nämä konjugoidut entsyymit inkuboidaan vastaavan substraatin kanssa.
Kuva 01: ELISA
Entsyymi-substraattireaktio tuottaa mitattavissa olevan värillisen tuotteen. Mittaamalla tuotteen määrä voidaan määrittää näytteessä olevien antigeenien määrä. Siksi ELISA on erittäin spesifinen ja kehittynyt tekniikka, joka vaatii ammattitaitoisten teknikkojen huomion. Se on myös aikaa vievä prosessi, joka vaatii kehittyneitä laitteita.
Mikä Western Blot on?
Western blottaus on tekniikka, joka mahdollistaa tietyn proteiinin havaitsemisen proteiiniseoksesta. Western blot on kalvo, jota käytetään blot-menettelyn aikana peilikuvan saamiseksi SDS-polyakryyliamidigeelin proteiinikuvioista. Western blottaukseen käytetty kalvo koostuu enimmäkseen nitroselluloosasta tai polyvinylideenidifluoridista (PVDF). Kalvoa, jossa on siirretty proteiini, voidaan käyttää tietyn proteiinin tunnistamiseen. Korkealaatuista vasta-ainetta tarvitaan halutun proteiinin havaitsemiseen hybridisaatiolla. Vasta-aine sitoutuu spesifiseen antigeeniinsä ja paljastaa halutun antigeenin, joka on proteiini, läsnäolon.
Kuva 02: Western Blot
Proteiinien siirto SDS-polyakryyliamidigeelistä Western blot -analyysiin suoritetaan elektroblottauksella. Se on tehokas ja nopea menetelmä, joka saa proteiinit elektroforeesiomaan geelistä ja siirtymään nitroselluloosakalvolle (Western blot).
Western blotting on hyödyllinen HIV-vasta-aineiden havaitsemisessa ihmisen seeruminäytteestä. Western blot -testiä voidaan käyttää myös hepatiitti B -infektion varmistustestinä ja hullun lehmän taudin lopullisena testinä.
Mitä yhtäläisyyksiä Elisan ja Western Blotin välillä on?
- Elisa ja Western blot ovat kahdenlaisia HIV:n diagnosointimenetelmiä.
- Molemmat menetelmät perustuvat immunodetektioon.
- Ne perustuvat vasta-aine-proteiinikompleksin muodostumiseen.
- Molemmat menetelmät voivat analysoida proteiineja.
- Elisa ja Western blotting ovat aikaa vieviä tekniikoita.
- Näiden tekniikoiden suorittamiseen tarvitaan hyvin koulutettu ja ammattitaitoinen henkilökunta.
Mitä eroa Elisalla ja Western Blotilla on?
ELISA on erittäin herkkä ja erittäin hienostunut menetelmä, joka havaitsee antigeenin ja vasta-aineen esiintymisen potilaan veressä, kun taas Western blot on tekniikka, joka havaitsee tietyn proteiinin proteiiniseoksesta. Tämä on avainero Elisan ja Western blotin välillä. Elisa on sekä laadullinen että määrällinen. Sitä vastoin Western blot on laadullinen. Joskus se on puolikvantitatiivista. Kun otetaan huomioon testin tekemiseen käytetty aika, Elisa-testi on aikaa vievä, kun taas Western blot on aikaa vievämpi kuin Elisa.
Alla oleva infografiikka tiivistää Elisan ja Western blotin eron.
Yhteenveto – Elisa vs Western Blot
ELISA on erittäin herkkä ja erittäin hienostunut menetelmä, joka havaitsee antigeenin ja vasta-aineen esiintymisen veressämme. Toisa alta Western blot -tekniikkaa kehitetään spesifisen proteiinin tunnistamiseksi proteiiniseoksesta. Tämä on avainero Elisan ja Western blotin välillä. ELISA oli ensimmäinen HIV:n havaitsemiseen suunniteltu testi. ELISA-testin tulosten vahvistamiseksi voidaan käyttää Western Blottia. Sekä ELISA että Western Blot katsotaan epäsuoriksi menetelmiksi HIV:n havaitsemiseen.
