Avainero radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välillä on se, että radioimmunomäärityksessä mitattava näyte tai yhdiste yhdistetään radioaktiiviseen antigeeniin ennen yhdistelmää, kun taas immunoradiometrisessa määrityksessä näyte tai yhdiste yhdistetään välittömästi radioaktiivisesti leimatun kanssa. vasta-aineita.
Immunomääritys on biokemiallinen testi, joka havaitsee makromolekyylien läsnäolon tai pitoisuuden liuoksessa käyttämällä vasta-ainetta tai antigeeniä. Fluoresoivia ja radioaktiivisia vasta-aineita käytetään antigeenien mittaamiseen näytteestä. Aluksi vasta-aineita käytettiin saostustekniikoissa, kuten immunosaostuksessa, immunodiffuusiossa ja immuunielektroforeesissa seerumin proteiinianalyysissä. Tällä hetkellä lääkkeiden, kasvainmerkkiaineiden ja hormonien mittaamiseen käytetään erittäin herkkiä tekniikoita, kuten radioimmunomääritystä ja immunoradiometrisiä määrityksiä.
Mikä on Radioimmunoassay Assay?
Radioimmunomääritys (RIA) on immunomääritys, jossa käytetään radioaktiivisia elementtejä muodostamalla vaiheittain antigeeni-vasta-ainekompleksit. RIA käyttää yleensä radioaktiivisia vasta-aineita näytteen antigeenin määrän havaitsemiseen. RIA on erittäin spesifinen ja erittäin herkkä in vitro -määritys. RIA:n periaate on kilpailukykyinen. Tässä radioaktiivinen antigeeni kilpailee ei-radioaktiivisen antigeenin kanssa vakiomäärästä vasta-ainetta tai reseptoria sitovia kohtia. RIA vaatii erityislupia ja varotoimia, koska radioaktiivisia aineita käytetään, ja se on edelleen yksi edullisimmista tekniikoista.
Kuva 01: Immunomääritys
RIA:n aikana tunnettu määrä antigeeniä tehdään radioaktiiviseksi usein leimaamalla se tyrosiiniin kiinnittyneillä jodin gammaradioaktiivisilla isotoopeilla. Sitten tämä antigeeni yhdistetään tunnettuun määrään vasta-ainetta. Tässä sekä antigeeni että vasta-aine sitoutuvat spesifisesti toisiinsa. Sitten lisätään veriseeruminäyte käynnistämään kilpaileva reaktio leimattujen antigeenien ja leimaamattomien antigeenien välillä seerumissa spesifisten vasta-aineiden kanssa. Tässä reaktiossa vasta-aineet vapauttavat tietyn määrän leimattua antigeeniä. Tämä määrä on verrannollinen leimatun ja leimaamattoman antigeenin suhteeseen. Lopuksi luodaan sitoutumiskäyrä potilaan veren seerumissa olevan antigeenin määrän johtamiseksi.
Mikä on immunoradiometrinen määritys?
Immunoradiometrinen määritys (IRMA) on immunomääritys, jossa käytetään radioaktiivisesti merkittyjä vasta-aineita. IRMA:ssa vasta-aineet leimataan radioisotoopeilla. Nämä vasta-aineet sitoutuvat tietyssä näytteessä oleviin antigeeneihin. Positiivisessa näytteessä radioaktiivisesti leimatut vasta-aineet sitoutuvat antigeenien vapaisiin epitooppeihin. Tämä muodostaa antigeeni-vasta-ainekompleksin.
Toisen reaktion aikana sitoutumattomat leimatut vasta-aineet poistetaan käyttämällä kiinteän faasin antigeeniä. Jäljellä oleva radioaktiivisten vasta-aineiden määrä liuoksessa on suora funktio antigeenipitoisuudesta. IRMA tunnetaan ylimääräisenä reagenssianalyysinä, jossa reagenssina käytetään ylimäärää radioleimattua vasta-ainetta. Tässä leimatun vasta-aineen tai antigeenin ylimäärän annetaan reagoida. Viimeisenä vaiheena antigeeniin sitoutuneet ja vapaat vasta-aineet erotetaan ja antigeeniin sitoutunut fraktio altistetaan radioaktiivisille määrityksille. Tässä fraktion aktiivisuus on suoraan verrannollinen antigeenin pitoisuuteen.
Mitä yhtäläisyyksiä radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välillä on?
- Sekä radioimmunomääritys että immunoradiometrinen määritys ovat immunomäärityksiä, joissa käytetään radioaktiivisia elementtejä antigeeni-vasta-ainekompleksien vaiheittaisessa muodostumisessa.
- Ne muodostavat antigeeni-vasta-ainekompleksin.
Mitä eroa on radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välillä?
Radioimmunomääritys on immunomääritys, joka määrittää vasta-ainetasot radioisotoopilla leimatulla antigeenillä, kun taas immunoradiometrinen määritys on ylimääräinen reagenssimääritys, jossa käytetään ylimääräistä radioleimattua vasta-ainetta. Näin ollen tämä on avainero radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välillä. IRMA pystyy tarjoamaan korkeamman herkkyyden kuin RIA. RIA:ssa antigeenit on leimattu jodin gamma-radioaktiivisilla isotoopeilla, kun taas IRMA-vasta-aineissa leimataan jodin isotoopeilla. Joten tämä on myös ero radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välillä. Koska IRMA on ylimääräinen reagenssitekniikka, määritys suoritetaan lyhyemmässä ajassa kuin RIA.
Seuraavassa taulukossa on yhteenveto radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välisistä eroista.
Yhteenveto – Radioimmunomääritys vs immunoradiometrinen määritys
Radioimmunomääritys on immunomääritys, joka käyttää radioaktiivisia elementtejä vaiheittain vasta-ainetasojen määrittämiseen. RIA käyttää yleensä radioaktiivisia vasta-aineita. Radioaktiivinen antigeeni kilpailee ei-radioaktiivisen antigeenin kanssa vakiomäärästä vasta-ainetta tai reseptoria sitovia kohtia. Immunoradiometrinen määritys on immunomääritys, joka suoritetaan näytteen antigeenitasojen määrittämiseksi käyttämällä radioleimattuja vasta-aineita. Nämä vasta-aineet sitoutuvat tietyssä näytteessä oleviin antigeeneihin. Jokaisen määrityksen lopussa muodostuu antigeeni-vasta-ainekompleksi. Määritystulosten saamiseksi piirretään sitoutumiskäyrä. Radioimmunomäärityksessä leimatun antigeenin määrä on verrannollinen leimatun ja leimaamattoman antigeenin suhteeseen, mutta immunoradiometrisessa määrityksessä antigeeniin sitoutuneen fraktion aktiivisuus on suoraan verrannollinen antigeenin pitoisuuteen. Tämä on yhteenveto radioimmunomäärityksen ja immunoradiometrisen määrityksen välisestä erosta.
