Avainero CLIA:n ja ECLIA:n välillä on, että CLIA käyttää kemiallista menetelmää kemiluminesenssin luomiseen, kun taas ECLIA käyttää sähkökemiallista menetelmää kemiluminesenssisignaalien tuottamiseen immunomääritystekniikassa.
Immunologisia määrityksiä käytetään laaj alti sairauksiin tai infektioihin liittyvien proteiinien tunnistamiseen ja kvantifiointiin. Siksi ne luottavat ensisijaisesti vasta-aine-antigeenisitoutumisen käsitteeseen. Immunomäärityksiä on monenlaisia, ja kemiluminesenssi-immunomääritykset ovat yksi tällainen nouseva kehitystekniikka. Sekä CLIA että ECLIA käyttävät kemiluminesenssiindikaattoreita.
Mikä on CLIA?
Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) on eräänlainen immunomääritys, joka käyttää luminesoivaa molekyyliä havaitsemiseen. Molekyylin lähettämä luminesenssi havaitaan spektrofotometrillä, yleensä aallonpituudella 300-800 nm. Kemiluminesenssi aiheuttaa atomien virittymisen, ja tekniikka tunnistaa eksergoniset kemialliset reaktiot sopivimmaksi energialähteeksi virityksen tuottamiseen.
CLIA-tekniikka tapahtuu kahdella päämenetelmällä, suoralla CLIA-tekniikalla ja epäsuoralla CLIA-tekniikalla. Suora CLIA-tekniikka käyttää suoria luminoforimarkkereita, jotka on sidottu kohteeseen, kun taas epäsuora CLIA-menetelmä käyttää entsymaattisia markkereita. Suorat luminoforimerkit sisältävät acidum- ja ruteniumesterit, kun taas epäsuoria markkereita ovat alkalinen fosfataasi adamantyyli-1,2-dioksetaaniaryylifosfaatti (AMPPD) -substraatilla ja piparjuuriperoksidaasi, jossa on luminoli tai sen johdannaiset substraattina.
Kuva 01: Kemiluminesenssi
CLIA:n tärkeimmät edut ovat toiminnallisuuden laaja dynaaminen alue, korkea signaalin intensiteetti, taustahäiriöiden puuttuminen, korkea spesifisyys, nopeus, vakaus ja yhteensopivuus eri määritysprotokollien kanssa. Sitä vastoin niiden korkeat kustannukset ja rajoitukset antigeenin havaitsemiseen ja testipaneeleihin ovat CLIA:n haittoja.
Mikä on ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) on uusi immunomäärityksen kehitystekniikka, jossa käytetään elektrokemiluminesenssin käsitettä. Elektroluminesenssin käsitteessä välituotteet syntyvät sähkökemiallisesti. Nämä elektronisesti generoidut välituotteet saavuttavat sitten virittyneen tilan ja johtavat valon emissioon. Aallonpituus, jolla valo säteilee, vastaa energiarakoa. Siten kemiluminesenssi syntyy, koska yksi tai useampi reagenssi tuotetaan elektrodille sähkökemiallisesti.
ECLIA on hyödyllinen analyyttinen sovellus, jolla on korkea herkkyys ja spesifisyys. Sitä käytetään pääasiassa eri patologisiin ja lääketieteellisiin tiloihin liittyvien proteiinien tunnistamiseen. Sen tärkeimpiä etuja ovat laajempi dynaaminen alue, monipuolisuus, spatiaalinen ja ajallinen ohjaus käyttämällä elektrodipotentiaalia, korkea herkkyys pikomolaarisiin alueisiin asti. Kuitenkin se, että se vaatii asiantuntevaa käsittelyä ja siihen liittyvät korkeat kustannukset, ovat sen haittoja.
Mitä yhtäläisyyksiä CLIA:n ja ECLIA:n välillä on?
- Molemmat tekniikat perustuvat antigeeni-vasta-ainesitoutumisen käsitteeseen.
- Lisäksi molempia käytetään pääasiassa proteiinien kvantifiointiin perustuvassa sairauden diagnostiikassa.
- Molemmat ovat herkkiä ja erityisiä sarjamenetelmiä.
- He käyttävät havaitsemiseen kemiluminesenssin käsitettä.
- Ne voidaan automatisoida.
- Molemmat vaativat spektrofotometrin havaitsemiseen.
- Molempien dynaaminen alue on laaja.
- Ne ovat kalliita tekniikoita.
Mitä eroa on CLIAlla ja ECLIAlla?
CLIA on immunomääritystekniikka, joka käyttää kemiluminesenssin teoriaa, kun taas ECLIA on immunomääritystekniikka, joka käyttää sähkökemian teoriaa yhdistettynä kemiluminesenssiin. Joten tämä on keskeinen ero CLIA:n ja ECLIA:n välillä. Siksi CLIA käyttää kemiallisia reaktioita, jotka johtavat kemiluminesenssisignaalien kehittymiseen, kun taas ECLIA käyttää sähkökemiallisia reaktioita, jotka johtavat kemiluminesenssisignaalien kehittymiseen.
Alla oleva infografiikka CLIA:n ja ECLIA:n eroista näyttää enemmän vertailuja molempien tekniikoiden välillä.
Yhteenveto – CLIA vs ECLIA
CLIA ja ECLIA ovat molemmat tekniikoita, joilla on tärkeä rooli sairauksien diagnostiikassa. Ne ovat kehittyneitä immunodiagnostiikan menetelmiä, jotka perustuvat vasta-aine-antigeenisitoutumisen käsitteeseen. Keskeinen ero CLIA:n ja ECLIA:n välillä on menetelmä kemiluminesenssin tuottamiseksi. Kun CLIA käyttää kemiallisia reaktioita kemiluminesenssin luomiseen vasta-aine-antigeenin sitoutumisen jälkeen, ECLIA käyttää sähkökemiallisia reaktioita kemiluminesenssin luomiseen. Molemmat tekniikat ovat kuitenkin nopeita ja tarkkoja.
