Avainero HEK293:n ja HEK293t:n välillä on, että HEK293 on immortalisoitu solulinja, joka on peräisin ihmisen alkion munuaisesta, joka on transfektoitu leikatulla ihmisen adenovirustyypin 5DNA:lla, kun taas HEK293t on tytärsolulinja, joka on johdettu alkuperäisestä HEK293-solulinjasta, joka on transfektoitu plasmidivektorilla, joka sisältää SV40:n replikaation aloituskohdan.
Transfektio määritellään yleensä prosessiksi, jossa vieraita DNA:ta ja RNA:ta viedään soluihin niiden genotyyppiin ja fenotyyppiin vaikuttamiseksi. Tällainen vieraiden nukleiinihappojen lisääminen erilaisilla biologisilla, kemiallisilla ja fysikaalisilla menetelmillä voi muuttaa solun ominaisuuksia. Viime kädessä tämä mahdollistaa geenin toiminnan ja proteiinin ilmentymisen tutkimuksen solun yhteydessä. HEK293 ja HEK293t ovat kaksi solulinjaa, joita on käytetty laajasti solubiologian tutkimuksessa useiden vuosien ajan niiden transfektio alttiuden vuoksi.
Mikä on HEK293?
HEK293 on immortalisoitu solulinja, joka on peräisin ihmisen alkion munuaisesta, joka on transfektoitu leikatulla ihmisen adenoviruksen tyypin 5 DNA:lla monien rekombinanttiproteiinien tuottamiseksi. Hollantilainen biologi Alex Van der Eb eristi HEK293:t alun perin ihmisen munuaissoluista vuonna 1973. Näitä soluja kasvatettiin naarassikiön kudosviljelmässä. Myöhemmin Frank Graham, Van der Ebin laboratorion tutkijatohtori, transfektoi heidät leikatulla ihmisen adenoviruksen tyypin 5 DNA:lla. Tämä solulinja sai nimen HEK293, koska se oli Frankin 293rd koe.
Kuva 01: HEK293
Adenovirusgeenien liittäminen HEK-solugenomiin mahdollistaa näiden solujen tuottaman suuren määrän rekombinanttiproteiineja erittäin tehokkaasti. Lisäksi adenovirusvektori sisältää CMV-promoottorialueen; näin ollen se lisää tätä tehokkuutta entisestään. Tätä solulinjaa on käytetty isäntänä geeniekspressiotutkimuksissa. Biotekniikkateollisuus käyttää tätä solulinjaa myös terapeuttisten proteiinien tuottamiseen geeniterapiaa varten.
Mikä on HEK293t?
HEK293t on tytärsolulinja, joka on peräisin alkuperäisestä HEK293-solulinjasta, joka on transfektoitu plasmidivektorilla, joka sisältää SV40:n replikaation aloituskohdan suuren määrän rekombinanttiproteiineja tuottamiseksi. HEK293t on ihmisen solulinja, joka ilmentää SV40-suuren T-antigeenin mutanttiversiota. HEK293t luotiin Michele Carlosin laboratoriossa Stanfordissa HEK29E-solulinjan stabiililla transfektiolla plasmidilla, joka koodaa SV40-suuren T-antigeenin lämpötilaherkkää mutanttia. Sitä kutsuttiin alun perin nimellä 293/tsA1609neo. Tämä johtuu siitä, että transfektio, jota käytettiin sellaisen solulinjan luomiseen, joka saa aikaan neomysiiniresistenssin ja SV40:n suuren T-antigeenin tsA 1609 -alleelin ilmentymisen.
Kuva 02: HEK293t
SV40:n suuren T-antigeenin mutanttiversion ilmentymisen ansiosta transfektoidut plasmidit, joilla on SV 40:n replikaation aloituskohta, voivat lisätä suuresti rekombinanttiproteiinin määrää. Tätä solulinjaa käytetään yleisesti bioteknologisessa teollisuudessa proteiinien ilmentämiseen ja rekombinanttien retrovirusten tuotantoon.
Mitä yhtäläisyyksiä HEK293:n ja HEK293t:n välillä on?
- HEK293 ja HEK293t ovat kaksi solulinjaa, joita on käytetty laajasti solubiologian tutkimuksessa niiden transfektio alttiuden vuoksi.
- Molemmat solulinjat ovat laboratorioperäisiä.
- Nämä solulinjat voivat lisätä huomattavasti rekombinanttiproteiinituotannon määrää.
- Ne valmistetaan transfektoimalla ihmisen alkion munuaissoluja plasmidivektorilla.
Mitä eroa on HEK293:n ja HEK293t:n välillä?
HEK293 on immortalisoitu solulinja, joka on peräisin ihmisen alkion munuaisesta, joka on transfektoitu leikatulla ihmisen adenoviruksen tyypin 5 DNA:lla. Sitä vastoin HEK293t on tytärsolulinja, joka on peräisin alkuperäisestä HEK293-solulinjasta, joka on transfektoitu plasmidivektorilla, joka sisältää SV40:n replikaation aloituskohdan. Joten tämä on avainero HEK293:n ja HEK293t:n välillä. Lisäksi HEK293 ei ekspressoi SV40:n suuren T-antigeenin mutanttiversiota. Toisa alta HEK293t ilmentää SV40:n suuren T-antigeenin mutanttiversiota.
Seuraava infografiikka listaa HEK293:n ja HEK293t:n väliset erot taulukkomuodossa vierekkäin vertailua varten.
Yhteenveto – HEK293 vs HEK293t
HEK293 ja HEK293t ovat kaksi solulinjaa, joita on käytetty laajasti solubiologian tutkimuksessa niiden tasaisen kasvun ja transfektio alttiuden vuoksi. HEK293 on immortalisoitu solulinja, joka on peräisin alkion ihmisen munuaisesta, joka on transfektoitu leikatulla ihmisen adenovirustyypin 5DNA:lla, kun taas HEK293t on tytärsolulinja, joka on peräisin alkuperäisestä HEK293-solulinjasta, joka on transfektoitu plasmidivektorilla, joka sisältää SV40:n replikaation aloituskohdan. Näin ollen tämä tiivistää eron HEK293:n ja HEK293t:n välillä.
