Haponkestävät vs ei-haponkestävät bakteerit
Hapon nopeiden ja ei-hapon nopeiden bakteerien välinen ero on periaatteessa niiden soluseinässä. Bakteerit tunnistetaan ja tarkkaillaan yleensä erilaisilla värjäysmenetelmillä. Haponkestävä värjäys on yksi tällaisista menetelmistä tietyntyyppisten bakteerien erottamiseksi muista. Tämän menetelmän löysivät ensin Franz Ziehl ja Friedrich Neelsen. Tuolloin tuberkuloosia aiheuttavia mykobakteereja ei voitu värjätä ja havaita muilla värjäysmenetelmillä, kuten gramvärjäyksellä. Neelsen ja Ziehl värjäsivät nämä bakteerit lisäämällä fenolia (karbolihappoa) ja emäksistä fuksiinia (e) yhdessä happaman alkoholin kanssa, joten väriaine tunnetaan nimellä Carbol Fuchsin(e) -liuos tai Ziehl – Neelsen -värjäys.
Haponkestävä värjäysmenettely
Jotta ymmärrämme haponnopeita ja ei-haponnopeita bakteereja, käymme ensin läpi värjäysmenettelyn. Haponkestävyys on bakteerin ominaisuus, joka kestää happojen tai happamien alkoholien aiheuttamaa värinpoistoa värjäyksen aikana. Tätä kuvaili alun perin Paul Ehrlich. Seuraavat kolme vaihetta suoritetaan värjäyksen aikana.
1. Primaarisen väriaineen käyttö – Karbolfuksiini on ensisijainen suulake, joka on tulvinut puhtaalle objektilasille lämpökiinnitettyyn bakteeripintaan. Lämpöä käytetään varmistamaan väriaineen tunkeutuminen sytoplasmaan.
2. Värinpoisto – happo-alkoholikäsittely primaarivärin poistamiseksi.
3. Vastavärjäys – Metyleenisinistä levitetään värittömien bakteerien katseluun.
Mitä ovat haponkestävät bakteerit?
Haponkestäviä bakteereja kutsutaan hapon kestäviksi bakteereiksi. Toisin sanoen bakteerit, jotka värjäytyvät edelleen punaisella värinpoistovaiheen jälkeen happonopean värjäyksen aikana, tunnetaan happonopeina bakteereina. Mikä tekee näistä bakteereista haponkestäviä? No, jos tarkastellaan haponkestävän bakteerin soluseinän poikkileikkausta, se voidaan helposti ymmärtää.
Haponkestävä värjäys (tai karbolfuksiini) sitoutuu vain bakteereihin, joilla on vahamainen soluseinä. Tämä soluseinä sisältää hydrofobista vahamaista lipidiä, joka tunnetaan nimellä mykolihappo ja joka peittää 60 % soluseinästä. Hydrofobisen ominaisuuden vuoksi vesiliukoisia materiaaleja estetään pääsemästä sytoplasmaan. Tästä syystä vesiliukoiset väriaineet, kuten metyleenisininen, eivät pysty värjäämään näitä bakteereja. Karbolfuksiini koostuu fenolista ja fukssiinista, jotta se voi tunkeutua sytoplasmaan asti.
Hapan alkoholin värinpoistovaiheen aikana hapan alkoholi estyy pääsemästä sytoplasmaan hydrofobisen mykolihapon läsnäolon vuoksi, joten se ei pysty poistamaan karbolfuksiinia bakteerisolusta. Joten primääriväriaine jää sytoplasmaan myös värinpoistovaiheen jälkeen.
Haponnopeat bakteerit sisältävät useita sukuja, kuten Mycobacterium ja Nocardia, jotka ovat patogeenisiä ihmisille ja aiheuttavat tuberkuloosia ja nokardioosia.
Acid Fast Bacteria on punaisella
Mitä ovat ei-haponnopeat bakteerit?
Jos bakteerilta puuttuu haponkesto, sitä kutsutaan ei-haponkestäviksi bakteereiksi. Hapon nopean värjäyksen jälkeen nämä bakteerit värjäytyvät sinisellä. Tämä johtuu siitä, että ei-happonopeilla bakteereilla on ohut soluseinä ja niistä puuttuu mykolihappo. Tämä mahdollistaa karbolfuksiinin tunkeutumisen sytoplasmaan. Se kuitenkin poistetaan happamalla alkoholikäsittelyllä, jolloin ei-haponnopeat bakteerisolut muuttuvat värittömiksi. Metyleenisininen on hyödyllinen tässä, jotta haponkestäviä bakteereja voidaan havaita selkeästi ja erottaa niistä.
Haponkestävät bakteerit voidaan värjätä gramvärjäyksellä tai millä tahansa muulla yksinkertaisella värjäysmenetelmällä. Esimerkkejä haponnopeista bakteereista ovat Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Haponnopeat bakteerit ovat sinisessä
Mitä eroa on haponnopeilla ja ei-haponnopeilla bakteereilla?
Haponkestävyys:
• Haponkestävät bakteerit osoittavat haponkestoa.
• Ei-haponnopeilta bakteereilta puuttuu haponkesto.
Soluseinä:
• Haponkestävät bakteerit sisältävät paksun soluseinän, jossa on mykolihappokerros.
• Ei-haponnopeista bakteereista puuttuu tämä kerros.
Gram Tahra:
• Haponkestäviä bakteereja on vaikeampi värjätä gramvärillä.
• Ei-haponkestävät bakteerit voidaan värjätä gramvärillä.
Patogeeninen tai ei-patogeeninen:
• Useimmat haponkestävät bakteerit ovat patogeenisiä.
• Ei-haponkestävät bakteerit voivat olla patogeenisiä tai ei-patogeenisiä.
Bacilli tai Cocci:
• Haponkestävät bakteerit ovat enimmäkseen basilleja.
• Ei-haponkestävät bakteerit voivat olla basilleja tai kokkeja.
