Avainero – virtaussytometria vs FACS
Soluteorian yhteydessä solut ovat kaikkien elävien organismien rakenteellinen ja toiminnallinen perusyksikkö. Solulajittelu on menetelmä, jota käytetään erilaisten solujen erottamiseen fysiologisten ja morfologisten ominaisuuksien mukaan. Niillä voi olla solunsisäisiä tai solunulkoisia ominaisuuksia. DNA:n, RNA:n ja proteiinien vuorovaikutusta pidetään solunsisäisinä interaktiivisina ominaisuuksina, kun taas muotoa, kokoa ja erilaisia pintaproteiineja pidetään solunulkoisina ominaisuuksina. Nykytieteessä solulajittelumetodologiat ovat johtaneet auttamaan biologisten tutkimusten erilaista tutkimusta ja myös uusien periaatteiden luomista lääketieteen tutkimuksen kautta. Solulajittelu suoritetaan erilaisilla menetelmillä, jotka sisältävät sekä primitiivisen ja vähemmän laitteita että edistyneitä teknologisia menetelmiä, joissa käytetään kehittyneitä koneita. Virtaussytometria, fluoresoivasti aktivoitujen solujen lajittelu (FACS), magneettinen soluvalinta ja yksittäisten solujen lajittelu ovat tärkeimpiä käytettyjä menetelmiä. Virtaussytometria ja FACS on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. FACS on erikoistunut virtaussytometrian tyyppi. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään analysoitaessa heterogeenistä solupopulaatiota eri solun pintamolekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. FACS on prosessi, jossa solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan säiliöön. Tämä on tärkein ero virtaussytometrian ja FACS:n välillä.
Mikä on virtaussytometria?
Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään tutkimaan ja määrittämään solunsisäisten molekyylien ilmentymistä ja solun pintaa sekä määrittelemään ja karakterisoimaan eri solutyyppejä. Sitä käytetään myös määritettäessä solutilavuutta ja solukokoa sekä arvioitaessa eristettyjen alapopulaatioiden puhtautta. Tämä mahdollistaa yksittäisten solujen moniparametrisen arvioinnin suunnilleen samaan aikaan. Virtaussytometriaa käytetään fluoresenssin voimakkuuden mittaamiseen, joka syntyy fluoresoivasti leimatuista vasta-aineista, jotka auttavat tunnistamaan proteiineja tai ligandeja, jotka sitoutuvat assosioituneisiin soluihin.
Kuva 01: Virtaussytometria
Yleensä virtaussytometria sisältää pääasiassa kolme alajärjestelmää. Ne ovat fluidiikka, elektroniikka ja optiikka. Virtaussytometriassa on saatavilla viisi pääkomponenttia, joita käytetään solujen lajittelussa. Ne ovat virtauskenno (nestevirta, jota käytetään niiden kuljettamiseen ja kennojen kohdistamiseen optista tunnistusprosessia varten), mittausjärjestelmä (voi olla eri järjestelmiä, mukaan lukien elohopea- ja ksenonlamput, suuritehoiset vesijäähdytteiset tai pienitehoiset ilmajäähdytteiset laserit tai diodilaserit), ADC; Analogi-digitaalimuunninjärjestelmä, vahvistusjärjestelmä ja tietokone analysointia varten. Keräys on prosessi, jolla tiedot kerätään näytteistä virtaussytometrillä. Tätä prosessia välittää tietokone, joka on yhdistetty virtaussytometriin. Tietokoneessa oleva ohjelmisto analysoi virtaussytometristä tietokoneeseen syötetyt tiedot. Ohjelmistolla on myös mahdollisuus säätää virtaussytometriä ohjaavan kokeen parametreja.
Mikä on FACS?
Virtaussytometrian yhteydessä fluoresenssiaktivoitu solulajittelu (FACS) on menetelmä, jota käytetään biologisten solujen seoksen näytteen erottamiseen ja lajitteluun. Solut erotetaan kahdesta tai useammasta säiliöstä. Lajittelumenetelmä perustuu solun fysikaalisiin ominaisuuksiin, jotka sisältävät solun valonsironta- ja fluoresenssiominaisuudet. Tämä on tärkeä tieteellinen tekniikka, jota voidaan käyttää luotettavien kvantitatiivisten ja laadullisten tulosten saamiseksi kustakin solusta lähetettävistä fluoresenssisignaaleista. FACS:n aikana alun perin saatu soluseos; suspensio suunnataan kapean nestevirran keskelle, joka virtaa nopeasti. Nesteen virtaus on suunniteltu erottamaan solut suspensiossa kunkin kennon halkaisijan perusteella. Suspensiovirtaan kohdistetaan tärinämekanismi, joka johtaa yksittäisten pisaroiden muodostumiseen.
Kuva 02: FACS
Järjestelmä on kalibroitu, jotta voidaan luoda yksi pisara yhdellä solulla. Juuri ennen pisaroiden muodostumista virtaussuspensio liikkuu fluoresenssin mittauslaitteistoa pitkin, joka havaitsee kunkin solun fluoresenssin ominaisuuden. Pisaroiden muodostumiskohtaan asetetaan sähköinen latausrengas, joka indusoidaan renkaaseen ennen fluoresenssin intensiteetin mittaamista. Kun pisarat muodostuvat suspensiovirrasta, pisaroiden sisään jää varaus, joka sitten siirtyy sähköstaattiseen poikkeutusjärjestelmään. Varauksen mukaan järjestelmä ohjaa pisarat eri säiliöihin. Panoksen levitystapa vaihtelee FACS:ssä käytettävien eri järjestelmien mukaan. FACS:ssä käytetty laite tunnetaan fluoresenssiaktivoituna solulajittelijana.
Mikä on samank altaisuus virtaussytometrian ja FACS:n välillä?
Virtaussytometria ja FACS on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan
Mitä eroa virtaussytometrialla ja FACS:lla on?
Virtaussytometria vs FACS |
|
| Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään analysoitaessa heterogeenistä solupopulaatiota eri solun pintamolekyylien, koon ja tilavuuden mukaan ja joka mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. | FACS on prosessi, jolla solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan säiliöön. |
Yhteenveto – Virtaussytometria vs FACS
Solu on kaikkien elävien organismien rakenteellinen ja toiminnallinen perusyksikkö. Solulajittelu on prosessi, jolla solut eristetään ja erilaistetaan eri luokkiin niiden solunsisäisten ja ekstrasellulaaristen ominaisuuksien perusteella. Virtaussytometria ja FACS ovat kaksi tärkeää menetelmää solujen lajittelussa. Molemmat prosessit on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään analysoitaessa heterogeenistä solupopulaatiota eri solun pintamolekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimuksen. FACS on prosessi, jossa solunäyteseos lajitellaan niiden valonsironta- ja fluoresenssiominaisuuksien mukaan kahteen tai useampaan säiliöön. Tämä on ero virtaussytometrian ja FACS:n välillä.
Lataa virtaussytometrian ja FACS:n PDF-versio
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä Virtaussytometrian ja FACS:n ero
