Avainero – DMEM vs EMEM
Eläinsoluviljelyä suoritetaan eläinsolulinjojen ylläpitämiseksi, jotta voidaan suorittaa monia tutkimustoimia. Eläinsolulinjoja ylläpidetään steriileissä olosuhteissa, ja ne vaativat erityisiä tekniikoita. Niitä käytetään rokotteiden tuotantoa koskevissa tutkimuksissa, solun käyttäytymisen tunnistamiseen syöpää aiheuttaviin tekijöihin ja mutageeneihin sekä syöpätutkimukseen. Soluviljelyalustat ovat erittäin tärkeitä eläinsoluviljelyn onnistumiselle. On olemassa erilaisia soluviljelyalustoja, kuten Dulbeccon modifioitu Eagle Medium (DMEM) ja Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM on modifioitu peruselatusaine, jonka aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet ovat jopa nelinkertaiset. Tämä sisältää myös joitain muita substituutioita, jotka lisäävät alustan ravintoolosuhteita. EMEM on yksi ensimmäisistä Harry Eaglen kehittämistä eläinsoluviljelyväliainetyypeistä. Se on yksinkertainen peruselatusaine, jossa on vähimmäismäärä ravinnekoostumuksia. Tärkein ero kahden väliaineen välillä on ravintoainekoostumus. EMEM koostuu pienimmistä ravintoainepitoisuuksista, joita tarvitaan viljelmän kasvuun, kun taas DMEM on monimutkainen elatusaine, jossa on kohonneet aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet.
Mikä on DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) on muunneltu väliainetyyppi, joka valmistetaan kaupallisesti kermanvalkoisena jauheena. Tämä on mukautettu EMEM:stä, ja ravintokoostumusta on muutettu lisäämällä aminohappojen ja vitamiinien pitoisuutta. Aminohappojen pitoisuus kasvaa jopa kaksinkertaiseksi perusalustaan verrattuna. Vitamiinipitoisuus kasvaa jopa nelinkertaiseksi, mikä lisää ravintoainepitoisuutta elatusaineessa.
DMEM on myös modifioitu lisäämällä suoloja, kuten ferrinitraattia, natriumpyruvaattia ja joitain ei-välttämättömiä aminohappoja, kuten seriiniä ja glysiiniä. Myös glukoosin pitoisuus väliaineessa muuttuu. Alkuperäinen formulaatio koostuu 1000 mg/l glukoosista, kun taas DMEM:ssä pitoisuus nostetaan 4500 mg/l:aan. DMEM vaatii myös seerumiväliaineen täydentämistä, koska se ei ole täydellinen alusta. Useimmiten DMEM:ää täydennetään fetal Bovine Serumilla (FBS). FBS tarjoaa tarvittavat proteiinit ja kasvutekijät viljelyprosessiin.
Alustan pH vaihtelee lisättäessä natriumbikarbonaattia. Alustan pH ennen natriumbikarbonaatin lisäämistä on noin 6,80 – 7,40, kun taas pH natriumbikarbonaatin lisäämisen jälkeen on välillä 7,60 – 8,20. Median säilytyslämpötila on 2–8 0C.
Kuva 01: DMEM
DMEM:n sovellukset
- Polyomaviruksen plakinmuodostuskyvyn tutkiminen hiiren alkiosoluissa.
- Kosketusnestotutkimuksissa
- Kanasoluviljelmissä
Mikä on EMEM?
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) on yksi ensimmäisistä eläinsolulinjojen soluviljelyssä kehitetyistä väliaineista. Ensimmäiset eläinsolulinjojen tyypit, joita on kasvatettu käyttämällä EMEM:ää, sisältävät hiiren L-solut ja HeLa-solut. EMEM-media on myös muunneltu media. Harry Eagle muotoili ensin EMEM-median. EMEM-väliaine sisälsi välttämättömiä aminohappoja ja vitamiineja solutyyppien vaatimassa vähimmäispitoisuudessa. Ei-välttämättömiä aminohappoja ei sisällytetty formulaatioon, ja glukoosi- ja natriumbikarbonaattipitoisuudet ovat pienentyneet. Vaikka elatusaine sisälsi tasapainoisen määrän vähimmäiskasvuvaatimuksia solujen onnistuneelle kasvulle.
EMEM ei ole täydellinen media. Siksi nisäkässolujen onnistunut kasvu edellyttää seerumin lisäystä. EMEM:ää käytetään monenlaisissa soluissa, ja se on edelleen suosittu väliaine soluviljelytutkijoiden keskuudessa.
Mitä yhtäläisyyksiä on DMEM:n ja EMEM:n välillä?
- Molempia alustatyyppejä käytetään eläinsoluviljelmässä.
- Molemmat väliainetyypit ovat nestemäisiä formulaatioita.
- Molemmat materiaalityypit ovat perusmediasta muokattuja materiaaleja.
- Molemmat kasvualustatyypit sisältävät välttämättömiä aminohappoja, vitamiineja ja epäorgaanisia suoloja, joita tarvitaan kasvuun.
- Molemmat mediatyypit ovat epätäydellisiä. Siksi seerumia tulee lisätä.
- Molemmat materiaalityypit käyttävät glukoosia hiilen lähteenä.
- Molempien väliaineiden pH on korkeampi, ja niitä säädetään lisäämällä natriumbikarbonaattia.
Mitä eroa on DMEM:n ja EMEM:n välillä?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM on muunneltu peruselatusaine, jossa on lisääntynyt aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet. Tämä sisältää myös joitain muita substituutioita, jotka lisäävät alustan ravintoolosuhteita. | EMEM on yksi ensimmäisistä Harry Eaglen kehittämistä eläinsoluviljelyväliainetyypeistä. Se on yksinkertainen peruselatusaine, jossa on vähimmäismäärä ravinnekoostumuksia. |
| Aminohapon modifikaatiot | |
| Aminohappopitoisuus on kasvanut jopa kaksinkertaiseksi DMEM-väliaineessa. | EMEM:ssä käytetään minimaalista aminohappopitoisuutta. |
| Vitamiinimuutokset | |
| Vitamiinipitoisuus on kasvanut jopa nelinkertaiseksi DMEM:ssä. | EMEM:ssä käytetään minimaalista vitamiinipitoisuutta. |
| Glukoosipitoisuus | |
| Glukoosipitoisuus on noussut 4500 mg/l:aan DMEM:ssä. | Glukoosipitoisuus on 1000 mg/l EMEM:ssä. |
| Ei-välttämättömien aminohappojen läsnäolo | |
| Lähetä DMEM:ssä. | Poissa EMEM:stä. |
| Lisäkomponenttien läsnäolo | |
| DMEM:ssä on komponentteja, kuten ferrinitraattia ja natriumpyruvaattia. | EMEM sisältää minimaalisen määrän ravintoaineita. |
Yhteenveto – DMEM vs EMEM
DMEM ja EMEM ovat kaksi suosittua eläinsoluviljelyalustaa, jotka eroavat pääasiassa ravinnekoostumuksistaan. DMEM on EMEM:n modifioitu muoto, jossa ravinnepitoisuuksia nostetaan samalla kun lisätään uusia komponentteja. EMEM on minimaaliväliaine ja sisältää kaikki olennaiset tekijät, joita tarvitaan eläinsolulinjojen onnistuneeseen kasvuun. Näitä väliaineita tulee käyttää erittäin steriileissä olosuhteissa, ja molempia elatusaineita tulee täydentää seerumilla ennen käyttöä. Tämä on ero DMEM:n ja EMEM:n välillä.
Lataa PDF-tiedosto DMEM vs EMEM
Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä Ero DMEM:n ja EMEM:n välillä
