Avainero agar-kuopan ja kiekkodiffuusiomenetelmän välillä on se, että agar-kuoppadiffuusiomenetelmässä uuteliuos täytetään agar-alustaan luotuun reikään tai kuoppaan, kun taas agar-kiekkodiffuusiomenetelmässä suodatinpaperikiekko testiliuosta sisältävä asetetaan agarin pinnalle.
Mikro-organismit ovat monien sairauksien aiheuttajia. On olemassa erilaisia mikrobilääkkeitä, jotka tappavat mikro-organismeja ja estävät tai pysäyttävät niiden kasvun. Antimikrobisen vaikutuksen havaitsemiseen on saatavilla erilaisia seulonta- ja arviointimenetelmiä. Niistä in vitro -analyysissä yleisesti käytettyjä menetelmiä ovat agar-kaivodiffuusiomenetelmä ja agarkiekkodiffuusiomenetelmät, jotka ovat agar-diffuusiomenetelmiä. Näitä menetelmiä käytetään laaj alti, koska ne eivät vaadi erityisiä laitteita ja lisäarviointia toistettavuuden ja standardoinnin os alta. Molemmat menetelmät riippuvat antimikrobisen aineen diffuusiosta agar-elatusaineen läpi.
Mikä on Agar Well -diffuusiomenetelmä?
Agarkaivon diffuusiomenetelmä on yksi halvimmista ja helpoimmista in vitro antimikrobisen aktiivisuuden testeistä. Tällä menetelmällä kasviuutteista ja mikrobiuutteista voidaan seuloa antimikrobinen aktiivisuus patogeenisiä mikrobilajeja vastaan. Tässä menetelmässä agar-levy v siirrostetaan patogeenisellä bakteerilajilla käyttämällä levityslevytekniikkaa. Tämä tehdään levittämällä tunnettu tilavuus mikrobiliuosta agarin pinnalle lasilevittimellä. Sitten tehdään reikä tai kuoppa (halkaisija 6-8 mm) aseptisesti steriilillä korkkiporalla. Seuraavaksi kuoppa täytetään uuteliuoksella (testiliuos), minkä jälkeen levyjä inkuboidaan sopivassa lämpötilassa ja sopivissa olosuhteissa. Inkuboitaessa antimikrobinen uuteliuos diffundoituu vähitellen agar-alustan läpi ja estää testattujen bakteerilajien kasvua. Lopuksi estoalue voidaan tarkkailla ja vyöhykkeen halkaisija otetaan mittaukseksi.
Mikä on agarlevydiffuusiomenetelmä?
Samanlainen kuin agar-kaivodiffuusiomenetelmä, agarkiekkodiffuusiomenetelmä on myös rutiininomaisesti käytetty antimikrobisen herkkyyden testausmenetelmä laboratorioissa. Tässä menetelmässä suodatinpaperilevyä, joka sisältää testiliuoksen, pidetään agar-alustalla. Sitä ennen agar-levy tulee ympätä testimikro-organismilla. Sitten suodatinpaperikiekko, joka sisältää tunnetun pitoisuuden uuteliuosta, asetetaan agar-alustaan. Sitten levyjä inkuboidaan sopivissa olosuhteissa.
Kuva 02: Agar-levydiffuusiomenetelmä
Inkuboitaessa uuteliuos diffundoituu agar-alustan läpi ja estää mikrobien kasvua. Inkuboinnin jälkeen estoalueen halkaisija mitataan ja sitä verrataan.
Mitä yhtäläisyyksiä agar-kaivolla ja levydiffuusiomenetelmällä on?
- Agar-kaivo- ja levydiffuusiomenetelmät ovat kahden tyyppisiä antimikrobisen herkkyyden testausmenetelmiä, jotka ovat agar-diffuusiomenetelmiä.
- Molemmat menetelmät ovat helppokäyttöisiä ja kustannustehokkaita.
- Ne tehdään rutiininomaisesti laboratorioissa.
- Siksi ne ovat in vitro
- Näillä molemmilla menetelmillä on mahdollista testata useita mikrobeja tai useita uutteita helposti.
- Tuloksen tulkinta on myös helppoa molemmilla tavoilla.
- Lisäksi ne eivät vaadi tietyntyyppisiä laitteita.
- Mutta kumpikaan menetelmä ei pysty erottamaan bakteereja tappavia ja bakteriostaattisia vaikutuksia.
- Lisäksi kumpikaan menetelmä ei sovellu pienimmän estävän pitoisuuden määrittämiseen.
Mitä eroa on agar-kaivolla ja levydiffuusiomenetelmällä?
Agarkuoppadiffuusiomenetelmä on antimikrobisen aktiivisuuden testi, jossa agar-elatusaineeseen luodaan reikä ja uuteliuos lisätään siihen. Samaan aikaan agarkiekkodiffuusiomenetelmä on antimikrobinen aktiivisuuskoe, jossa suodatinpaperikiekko, joka sisältää tunnetun pitoisuuden uuteliuosta, asetetaan agar-alustaan. Joten tämä on keskeinen ero agar-kuopan ja levydiffuusiomenetelmän välillä. Siksi uuteliuos lisätään agar-kuoppaan tai reiän agarkuoppa -diffuusiomenetelmään, kun taas uuteliuos lisätään suodatinpaperikiekkoon agar-kiekkodiffuusiomenetelmässä. Näin ollen agar-kuoppa-diffuusiomenetelmä ei käytä suodatinpaperikiekkoa, kun taas agar-kiekkodiffuusiomenetelmä ei luo agar-reikiä agar-alustaan.
Ennen on rinnakkainen vertailu agar-kuopan ja kiekon diffuusiomenetelmän eroista.
Yhteenveto – Agar Well vs Disc diffuusiomenetelmä
Agar-kaivo- ja kiekkodiffuusiomenetelmät ovat kahdenlaisia antimikrobisen herkkyyden testausmenetelmiä. Molemmat menetelmät ovat yksinkertaisia ja edullisia in vitro -menetelmiä. Agar-kaivodiffuusiomenetelmässä alustaan luodaan reikä tai kuoppa, jonka jälkeen uuteliuos lisätään kuoppaan antimikrobisen aktiivisuuden arvioimiseksi. Sitä vastoin agarkiekkodiffuusiomenetelmässä uuteliuos lisätään suodatinpaperikiekolle ja asetetaan sitten agar-pinnalle. Tämä on siis tärkein ero agar-kuopan ja kiekon diffuusiomenetelmän välillä.
