Avainero – kiinnittyneet vs. ripustussolulinjat
Solulinja on pysyvästi vakiintunut soluviljelmä, jota voidaan lisätä ja kasvattaa erityisolosuhteissa. Useita solulinjoja, kuten syöpäsolulinjoja, hepatosyyttejä ja luuydinsoluja, ylläpidetään solulinjoina tutkimuksen helpottamiseksi. Solulinjat valmistetaan primääriviljelmistä, ja ne voivat olla pääasiassa kahta tyyppiä, nimittäin kiinnittyviä soluviljelmiä ja suspensiosoluviljelmiä. Siten näistä viljelmistä johdettuja solulinjoja kutsutaan tarttuviksi solulinjoiksi ja suspensiosolulinjoiksi. Kiinnittyneet solulinjat ovat solulinjoja, joissa primaariviljelmät ovat kiinnittyneet kiinteälle alustalle ja ovat siten kiinnittymisestä riippuvaisia soluja. Suspensiosolulinjat ovat solulinjoja, joissa viljelmät suspendoidaan nestemäiseen väliaineeseen, jolloin solut jäävät nestemäiseen väliaineeseen. Ne eivät ole kiinnityspaikasta riippuvaisia. Avainero kiinnittyvien ja suspensiosolulinjojen välillä on solujen kiinnitysriippuvuus. Kiinnittyneet solulinjat tarvitsevat kiinteää tukea kasvulleen, joten se on kiinnityspaikasta riippuvainen, kun taas suspensiosolulinjat ovat kiinnityspaikasta riippumattomia eivätkä tarvitse kiinteää tukea kasvua varten.
Mitä ovat kiinnittyneet solulinjat?
Kiinnittyneet solulinjat ovat solulinjoja, jotka ovat kiinnityspaikasta riippuvaisia. Siksi nämä solulinjat tarvitsevat vakaata tukea kasvulleen. Suurin osa uutetuista selkärankaisten soluista (hematopoieettisia soluja lukuun ottamatta) ovat kiinnityspaikasta riippuvaisia. Siksi useimpia selkärankaisten soluja viljellään yhdessä tartuntaaineen kanssa, joka varmistaa solujen tasaisen kasvun.
Suurin osa kiinnittyneistä solulinjoista muodostuu kudosviljelmällä käsitellyssä suonessa, ja niiden kasvu rajoittuu suonen tai kiinnittyneen alueelle. Kun soluja käsitellään tarttuvan solulinjan viljelyä varten, solut tulee erottaa trypsinisoinnilla ja sitten tulisi käyttää toistuvia siirtotekniikoita kiinnittyvien solulinjojen muodostamiseksi. Kiinnittyneistä viljelmistä valmistettujen solulinjojen yleisiä käyttökohteita ovat sytologia ja sytogenetiikka. Niitä käytetään myös tutkimustarkoituksiin.
Mitä ovat suspensiosolulinjat?
Suspensiosolulinjat ovat riippumattomia ankkurointipisteestä. Ne ovat peräisin suspensioviljelmästä, joka voi kasvaa helposti suspendoidussa nestemäisessä väliaineessa. Suspensiosoluviljelmiä tulee sekoittaa jatkuvasti niiden kasvun ylläpitämiseksi. Ihmisen hematopoieettisia soluja viljellään pääasiassa suspensioviljelminä, joten niitä ylläpidetään suspensiosolulinjoina, kun niitä käytetään tutkimustarkoituksiin.
Suspensiosolulinjojen ylläpito vaatii jatkuvaa sekoitusta ja muutamia siirtotoimenpiteitä. Suspensiosolujen kasvua rajoittaa solujen konsentraatio väliaineessa. Siten ajan myötä kasvutekijät ja elatusaineen ainesosat vähenevät ja rajoittavat solujen kasvua.
Kuva 01: Pseudomonas spp:n suspensioviljely
Suspensiosolulinjat ovat kaupallisessa tuotannossa yleisimmin käytetty primäärisolulinjatyyppi. Useimpia mikrobisoluja ylläpidetään suspensiosoluina, joissa niitä käytetään hyödyllisten sekundaaristen metaboliittien, kuten antibioottien, vitamiinien, aminohappojen ja proteiinien, uuttamiseen. Suspensiosolulinjaviljelmät tuottavat paljon enemmän tuotteita kuin kiinnittyneet solulinjat ja ne ovat vähemmän työläitä ja vaativat vähemmän kustannuksia kiinnittyviin solulinjoihin verrattuna.
Mitä yhtäläisyyksiä tarttuvien ja suspensiosolulinjojen välillä on?
- Sekä adherentit että suspensiosolulinjat ovat peräisin primäärisistä soluviljelmistä.
- Sekä tarttuva että suspensiosolulinjat vaativat optimaaliset alusta- ja kasvuolosuhteet maksimaalisen kasvun mahdollistamiseksi.
- Sekä tarttuvia että suspensiosolulinjoja valmistetaan in vitro -olosuhteissa ja niitä voidaan säilyttää erityisissä säilytysolosuhteissa.
- Sekä tarttuva- että suspensiosolulinjat vaativat jatkuvaa siirtoa tuoton lisäämiseksi.
- Sekä tarttuvia että suspensiosolulinjoja käytetään kudosviljelytekniikoissa, farmakologisissa tutkimuksissa lääkeaineenvaihdunnan arvioimiseksi ja sairauksien diagnostiikassa.
Mitä eroa on tarttuvilla ja suspensiosolulinjoilla?
Adherent vs Suspension Cell Lines |
|
Kiinnittyneet solulinjat ovat solulinjoja, joissa primaariviljelmät on kiinnitetty kiinteään kantajaan. | Suspensiosolulinjat ovat solulinjoja, joissa viljelmät suspendoidaan nestemäiseen väliaineeseen, jolloin solut pysyvät nestemäisessä väliaineessa. |
Anchorage Dependency | |
Kiinnittyneet solulinjat ovat kiinnityspisteestä riippuvaisia. | Keskeytyssolulinjat ovat kiinnityspisteistä riippumattomia. |
Agitaatio | |
Kiinnittyneet solulinjat eivät vaadi sekoitusta. | Keskeytyssolulinjat vaativat sekoitusta. |
Trypsinointi | |
Trypsinisaatiota esiintyy kiinnittyneissä solulinjoissa. | Trypsinointi puuttuu suspensiosolulinjoista. |
Kudosviljelmällä käsitellyt verisuonet | |
Vaaditaan kiinnittyneissä solulinjoissa. | Ei vaadita suspensiosolulinjoissa. |
Tuotto | |
Kiinnittyneet solulinjat johtavat pienempään saantoon. | Suspensiosolulinjat johtavat korkeampaan saantoon. |
Yhteenveto – Kiinnittyneet vs. ripustussolulinjat
Solulinjojen ylläpito on tärkeä prosessi eläinsoluviljelmien sekä kasvikudosviljelmien soluviljelyssä. Lisäksi solulinjoja ylläpidetään myös mikrobisoluille, joita käytetään laajasti teollisissa prosesseissa. Solulinjoja voidaan kutsua joko kiinnittyneiksi solulinjoiksi tai suspensiosolulinjoiksi. Kiinnittyneet solulinjat ovat peräisin kiinnittyneistä primäärisistä soluviljelmistä, ja ne ovat kiinnityspaikasta riippuvaisia. Suspensiosolulinjat ovat peräisin suspension primäärisistä soluviljelmistä. Nämä solut ovat nestemäisessä väliaineessa, ja solujen jatkuvaa ravistelua tarvitaan solujen kasvuun. Tämä on ero kiinnittyneiden solulinjojen ja suspensiosolulinjojen välillä.